锌指蛋白639

ZNF639 是一种 DNA 结合锌指蛋白,具有转录因子的功能(Bruce 等,2013)。

▼ 克隆与表达
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伊本等人(2003)在食管鳞状细胞癌(ESC; 133239 ) 中3q26 扩增的关键区域鉴定了人类 ZNF639 基因,他们称之为 ZASC1,并克隆了 cDNA。预测的 485 个氨基酸蛋白质的计算分子量为 56.05 kD,在其 C 端部分包含 9 个 C2H2 型锌指基序。Northern印迹分析在大多数测试的人体组织中检测到4.8-kb的转录物,在心脏和骨骼肌中表达丰富,在肾脏、肝脏和胰腺中表达相对较高。表位标记的 ZASC1 仅定位于转染的 COS-7 细胞的细胞核中。

Bogaerts 等人(2005)在人类、非洲爪蟾、小鼠、大鼠和鸡中发现了 ZASC1 直向同源物,所有这些都显示出显着的保守性,尤其是在 C 端锌指区域。免疫细胞化学分析显示内源性 ZASC1 在人 MCF7/AZ 细胞中的核定位。

▼ 基因结构
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伊本等人(2003)确定 ZASC1 基因包含至少 7 个外显子,跨度约为 12.5 kb。

▼ 测绘
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使用 FISH,Imoto 等人(2003)将 ZASC1 基因定位到染色体 3q26.3。

▼ 基因功能
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伊本等人(2003)表明人 ZASC1 的外源表达促进了 ESC 细胞的生长。ZASC1 的下调抑制了 ESC 细胞的生长。

Bogaerts 等人使用酵母 2-杂交和免疫沉淀分析(2005)表明 ZASC1 与 α-N-连环蛋白(CTNNA2; 114025 )相互作用,ZASC1 的6 到 8 个锌指基序对于相互作用是必要和充分的。异位表达的 ZASC1 定位于 HEK293T 细胞的细胞核,并将细胞质 α-N-连环蛋白募集到细胞核。此外,ZASC1 结合双链基因组 DNA,荧光素酶报告基因检测表明 ZASC1 是一种剂量依赖性转录抑制因子。

布鲁斯等人(2013)发现 ZASC1 特异性结合人类免疫缺陷病毒(HIV)-1(见609423)启动子紧邻反式激活反应区(TAR) 的上游,这是一种结构化的 RNA 元件,HIV-1 TAT/P-TEFb 位于该元件上(见603251) 复杂的组装。通过与 HIV-1 启动子结合,ZASC1 通过促进转录延长来调节基因表达。因此,敲低 HEK293T 细胞中的 ZASC1 可抑制 HIV-1 感染。RT-PCR 证实 ZASC1 被募集到 HIV-1 启动子并调节原代 T 细胞中的转录延伸。HIV-1 启动子的 ZASC1 结合位点的突变表明 ZASC1 不影响启动子的基础活性。相反,病毒 TAT 蛋白对于 HIV-1 转录的 ZASC1 依赖性调节很重要,因为 ZASC1 刺激了 HIV-1 启动子的 TAT 激活。免疫沉淀实验表明,ZASC1 与 HIV-1 TAT 和细胞 P-TEFb 相互作用,并以不依赖 TAR 的方式介导 TAT 和 P-TEFb 募集到 HIV-1 核心启动子,从而增强 HIV-1 转录延伸。

▼ 动物模型
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赛德尔等人(2013)发现 Zacs -/- 小鼠以正常的孟德尔比率出生,体重和寿命与野生型相似,没有明显的身体或行为缺陷。流式细胞术分析显示,Zasc -/- 小鼠的 B 和 T 淋巴细胞水平正常,但它们在骨髓中表现出改变的常见髓样祖细胞分化。与野生型相比,用莫洛尼鼠白血病病毒攻击显示在早期时间点 ZASC1 -/- 小鼠骨髓中的病毒复制减少。然而,Zasc1 的缺失不会影响随后肿瘤进展的时间或由感染引起的肿瘤类型。