Nivelon-Nivelon-Mabille 综合征

黑色素瘤是一种免疫原性相对较高的癌症,对白细胞介素 2(IL2; 147680 ) 或肿瘤浸润淋巴细胞(TIL) 治疗敏感。黑色素瘤特异性抗原,例如 MART1(MLANA; 605513 ) 和特异性肽是肿瘤治疗的目标。Kawakami 等人使用黑色素瘤细胞系的 cDNA 表达克隆并使用 HLA-A1 限制性 TIL 进行筛选(2001)分离出编码 MART2 的 cDNA。推导出的 MART2 蛋白含有 453 个氨基酸。数据库分析揭示了一个同源 cDNA(GenBank AK001586) 从编码 493 个氨基酸的蛋白质以及源自 1q32 的基因组 DNA 的畸胎癌中分离。RT-PCR 和 Northern 印迹分析检测到在正常组织和癌细胞系中普遍存在的表达。从黑色素瘤细胞系中分离的 MART2 序列的特征在于存在 G 到 A 转换,导致 P 环(FLGGNEVGKTY) 中的 leu 后出现 gly 到 glu 取代,这在 T 细胞中没有发生来自同一个病人。在源自畸胎癌细胞系的 MART2 序列中发现了不同的氨基酸取代(asn 到 asp)。功能分析确定 MART2 中的突变 P 环缺乏在野生型蛋白中观察到的 GTP 结合活性,表明可能参与黑色素瘤的发展;然而,190020 ) P 环突变。进一步分析表明,HLA-A1 限制性 TIL 识别突变黑色素瘤 P 环序列但不识别野生型 P 环序列,可能是由于 HLA-A1 结合抗原突变肽中存在带负电荷的锚氨基酸.

果蝇“瘦刺猬”(ski1)编码一种酶,该酶在分泌途径中起作用以催化“刺猬”的 N 末端棕榈酰化(参见600725)。夏蒙等人(2001)对果蝇刺猬信号通路的成分进行了遗传筛选,发现“瘦刺猬”的突变产生了典型的由刺猬或“无翅”功能丧失引起的表型。ski1 蛋白与膜结合的 O-酰基转移酶具有短但重要的序列同源性。

卡利尔等人(2014 年)在人类胎儿组织中进行了表达分析,并在所研究的大多数器官中观察到不同水平的 HHAT 表达,包括睾丸和卵巢以及肺、心脏、肠、舌和肾。成人睾丸中的 qRT-PCR 揭示了支持细胞中高水平的 HHAT 表达。在小鼠中,在性别确定之前,在胚胎第(E) 10.5 天,在 XX 和 XY 性腺的体细胞祖细胞中观察到 Hhat 转录物。睾丸分化后,E13.5 使 XY SF1+ 细胞中的 Hhat 转录水平增加了 2.5 倍。作者认为 HHAT 在性别决定时在支持细胞谱系中表达,后来在支持细胞中表达。

▼ 分子遗传学

在一名患有 Nivelon-Nivelon-Mabille 综合征(NNMS; 600092 )的 46,XY 女性患者中, Callier 等人(2014)确定了 HHAT 基因(G287V; 605743.0001 ) 错义突变的纯合性,该突变在她未受影响的父母中以杂合性存在,但在 dbSNP 数据库中未发现。功能分析显示 G287V 突变体对刺猬蛋白的棕榈酰化缺失。

在患有 NNMS 的两个 46、XX 沙特阿拉伯姐妹中,Abdel-Salam 等人(2019)确定了 HHAT 基因(L257P; 605743.0002 ) 错义突变的纯合性,该突变存在于其近亲父母的杂合性中,但在其健康的姐姐或沙特阿拉伯对照中未发现。

▼ 动物模型

丹尼斯等人(2012)研究了 'Creface' 转基因小鼠品系,其中核定位 Cre 重组酶由特定的 TFAP2A( 107580) 增强元素。使用基于 PCR 的 DNA 步行和作图方法,作者确定 Creface 转基因已整合到 Hhat 基因的内含子 9 的核苷酸位置 22949,并证实 Hhat 表达在纯合 Creface 突变胚胎中显着减少或缺失。没有存活的出生后 Hhat Creface/Creface 突变小鼠;突变胚胎的表型包括前脑全畸形;颅面间充质广泛凋亡;额鼻、中外侧、上颌和下颌隆突发育不全;面部突起和颅神经节的图案缺陷;和减少软骨形成和成骨。这些异常共同导致中面发育不全和下颌发育不全。除了全前脑畸形和无颌畸形,纯合突变胚胎除了颅骨的腹侧骨骼外,其他所有骨骼均缺失,鼻骨、额骨、顶骨和顶间骨完全发育不全,以及基底枕骨、枕骨和基底蝶骨严重发育不全。作者将 Hhat Creface/Creface 指定为一种新的颅骨-前脑无颌畸形小鼠模型。

卡利尔等人(2014)分析了 Hhat 敲除小鼠模型 Hhat Creface/Creface 小鼠的睾丸发育。在性别决定期间,性腺发育的早期阶段通常发生在胚胎日(E) 11.5 之前,并且睾丸程序的启动不受影响。然而,到 E12.5,XY 胚胎的睾丸发育显着受损,睾丸大小大量减少;睾丸索的数量减少,其形状和直径也出现不规则;几乎完全没有胎儿间质细胞。作者得出结论,HHAT 不是支持细胞定型所必需的,但它在睾丸索的正常形成和睾丸间质细胞的分化中发挥作用。

▼ 等位基因变体( 2 示例):

.0001 NIVELON-NIVELON-MABILLE 综合征
HHAT,GLY287VAL
在一名患有 Nivelon-Nivelon-Mabille 综合征(NNMS; 600092 )的 46,XY 女性患者中, Callier 等人(2014)确定了 HHAT 基因中 c.860G-T 颠换(c.860G-T, NM_001122834) 的纯合性,导致长异构体中的 gly287-to-val(G287V) 取代(相当于 c.449G -T 颠换和 HHAT 短异构体中的 G150V 替代)。位于高度保守的膜结合 O-酰基转移酶(MBOAT) 结构域内的第六个预测跨膜结构域旁边的 G287 残基在物种间也得到很好的保守。先证者未受影响的父母是该变异的杂合子。使用 SSH 的体外棕榈酰化测定( 600725) 分析 HHAT 活性表明,与野生型 HHAT 的稳健结合相比,没有将(125) I-碘棕榈酸酯与突变体结合到 SHH 中。使用 DHH( 605423 ) 重复实验,这是唯一在性腺中表达的刺猬蛋白,作者证明 HHAT 直接棕榈酰化 DHH,并且 G287V 突变导致活性丧失。

.0002 NIVELON-NIVELON-MABILLE 综合征
HHAT,LEU257PRO
在两名患有 Nivelon-Nivelon-Mabille 综合征(NNMS; 600092 )的 46,XY 沙特阿拉伯姐妹中, Abdel-Salam 等人(2019)确定了 HHAT 基因中 c.770T-C 转换(c.770T-C,NM_018194.5)的纯合性,导致 leu257 到 pro(L257P)取代。他们未受影响的近亲父母是该突变的杂合子,在他们健康的姐姐或内部全外显子组测序数据库中的 2,379 名沙特阿拉伯对照中未发现该突变。