半胱氨酰白三烯受体 1; CYSLTR1

CYSLT1
CYSLT1R

HGNC 批准的基因符号：CYSLTR1

细胞遗传学位置：Xq21.1 基因组坐标（GRCh38）：X:78,271,467-78,327,610（来自 NCBI）

▼ 描述

半胱氨酰白三烯 LTC4（246530）、LTD4 和 LTE4 介导平滑肌收缩和血管通透性，与人类支气管哮喘（600807）有关。半胱氨酰白三烯激活 2 个受体 CYLSTR1 和 CYLSTR2（605666），它们属于 7 次跨膜 G 蛋白偶联受体家族。CYLSTR1 对 LTD4 显示出最高的亲和力，其次是 LTC4 和 LTE4（Maekawa 等人总结，2009）。

▼ 克隆和表达

Lynch 等人（1999）报道了克隆的人 CYSLT1 受体的分子特征。CYSLT1 受体与人类孤儿 G 蛋白偶联受体 HG55 相同。它与嘌呤受体 P2Y1（601167）和血小板激活因子受体（173393）具有 32% 的氨基酸同一性，与 BLT 受体（601531）具有 28% 的氨基酸同一性。该 cDNA 编码 337 个氨基酸的蛋白质，计算分子量为 38,549 Da。Northern 印迹分析显示大约 3 kb 的 CYSLT1 mRNA 在脾脏、外周血白细胞和肺中表达。在正常人肺中，CYSLT1 mRNA 的表达仅限于平滑肌细胞和组织巨噬细胞。

萨劳等人（1999）克隆了人类 CYSLTR1。推导的 337 个氨基酸是假定的 7 次跨膜 G 蛋白偶联受体。Northern印迹分析检测到肺、胰腺、前列腺、骨骼肌、胎盘、脑、结肠、心脏、脾、肾、外周血白细胞、肝脏、小肠和支气管中大约2.8-kb CYSLTR1转录物的可变表达。在卵巢、胸腺和睾丸中几乎没有检测到表达。

Woszczek 等人使用外周血单核细胞、THP-1 急性单核细胞白血病细胞系和 U937 组织细胞白血病细胞系的 3-prime 和 5-prime RACE（2005）鉴定了 4 个 CYSLT1R 剪接变体。所有 4 个变体均包括非编码外显子 1（包含 30 个可能的转录起始位点）和外显子 5（包含整个 ORF 和 3-prime UTR）。它们的不同之处在于包含或排除非编码外显子 2、3 和 4。转录本 I 包含外显子 1、4 和 5，存在于所有检查的细胞中，并且是最丰富的变体，占分析克隆的 80%。转录本 II 仅包含外显子 1 和 5，在所有检查的细胞中表达较弱。仅在 THP-1 细胞中检测到转录本 III（包括外显子 1、3、4 和 5）和转录本 IV（包括外显子 1、2、3 和 5）。RT-PCR 在大多数检查组织中检测到转录本 I，其中在血液白细胞、脾脏、胸腺、肺、肾和心脏中表达最高。转录本 II 的表达比转录本 I 的表达更弱，主要在血液白细胞、甲状腺和肺中检测到。

▼ 基因功能

Lynch 等人（1999）报道了人类 CYSLT1 受体的药理学特征。他们描述了 LTD4 和 LTC4 对该受体的功能激活（钙动员），以及半胱氨酰白三烯和 3 种结构不同类别的 CYSLT1 受体拮抗剂竞争放射性标记的 LTD4 与该受体的结合。林奇等人（1999）指出CYSLT1选择性拮抗剂，例如孟鲁司特、扎鲁司特和普仑司特，在哮喘的治疗中很重要。

通过分析转染的 HEK293、COS-7 和 CHO 细胞，Sarau 等人（1999）表明 CYSLTR1 通过钙动员反应选择性地响应 LTC4、LTD4 和 LTE4。CYSLTR1 对 LTD4 的激活最敏感。

梅勒等人（2001）报道，人类脐带血来源的肥大细胞表达 CYSLT1 受体，该受体不仅对炎症来源的 CYSLT 做出反应，还对嘧啶能配体 UDP 做出反应。该观察被认为提供了支气管哮喘的炎症和神经源性因素之间的明显交叉点。

Woszczek 等人使用 CYSL1R 启动子区域的报告基因检测（2005）发现 STAT6 增加了 CYSLT1R 的表达（601512）。STAT6 在 IL4（147780）刺激的 THP-1 细胞的核提取物中结合 DNA，但在未刺激的 THP-1 细胞中不结合。RT-PCR 和流式细胞术分析表明，IL4 刺激以剂量和时间依赖性方式增加 CYSLT1R mRNA 的表达和 CYSLT1R 蛋白的细胞表面外观。用 LTD4 以及更弱的 LTC4 处理 IL4 引发的 THP-1 细胞，诱导单核细胞趋化剂 CCL2 的表达（158105）。CCL2 表达被 CYSLT1R 的特定化学抑制剂阻断。

Maekawa 等人使用小鼠 cDNA（2009）表明 G 蛋白偶联受体 Gpr17（603071）下调 Cyslt1r 的功能，但不下调其膜定位。Gpr17 与 Cyslt1r 的共转染抑制了 LTD4 结合并抑制了 Cyslt1r 介导的 Erk（参见 MAPK1；176948）响应 LTD4 的磷酸化。免疫共沉淀研究表明 Gpr17 和 Cyslt1r 直接相互作用。共聚焦免疫荧光显微镜显示 GPR17 和 CYSLT1R 在人外周血单核细胞表面共定位。在小鼠骨髓源性巨噬细胞中沉默 Gpr17 会增加 Cyslt1r 膜表达，并增加对 LTD4 诱导的钙流的强度和敏感性。小鼠中 Gpr17 缺陷增加了 IgE 依赖性肥大细胞介导的被动皮肤过敏反应中 Cyslt1r 介导的血管通透性。Cyslt1r 的药理抑制可显着抑制 Gpr17 缺陷小鼠的血管渗漏。前川等人（2009）得出结论，GPR17 充当 CYSLT1R 的负调节因子。

▼ 基因结构

Sarau 等人（1999）确定 CYSLTR1 基因包含单个编码外显子。

沃兹切克等人（2005）确定 CYSLTR1 基因包含 5 个外显子，跨度约为 56 kb。前 4 个外显子是非编码的，外显子 2 到 4 进行选择性剪接。外显子 1 包含 30 个可能的转录起始位点。外显子 5 包含整个 ORF 和 3-prime UTR，其中有 5 个聚腺苷酸化信号。启动子区域不含 TATA，但包含 STAT6、AP1（参见 165160）和 GATA（参见 305371）转录因子的结合位点。小鼠和人CYSLTR1的启动子区域具有高度的同源性。

▼

通过单染色体体细胞杂交和辐射杂交分析进行绘图，Lynch 等人（1999）将人类 CYSLT1 基因定位到染色体 Xq13-q21。

▼ 动物模型

前川等人（2002）通过靶向基因破坏产生了 Cyslt1r 缺陷小鼠，该基因破坏了短亚型和长亚型。钙动员分析显示，同时表达 Cyslt1r 和 Cyslt2r 的野生型小鼠对 LTD4 反应强烈，对 LTC4 反应轻微，而突变型小鼠则对两者均无反应。注射酵母聚糖 A 或 IgE 介导的被动皮肤过敏反应后，血浆蛋白外渗明显受到抑制，但中性粒细胞浸润并未受到抑制。