C 型凝集素结构域家族 4，成员 D； CLEC4D

凝集素，C 型，超级家族成员 8；CLECSF8
CLEC6
巨噬细胞 C 型凝集素；MCL
DECTIN 3

HGNC 批准的基因符号：CLEC4D

细胞遗传学位置：12p13.31 基因组坐标（GRCh38）：12:8,513,491-8,522,365（来自 NCBI）

▼ 描述

钙依赖性（C 型）凝集素，例如 CLEC4D，含有参与病原体识别和细胞间相互作用的碳水化合物识别域（CRD）。C 型凝集素在巨噬细胞和其他抗原呈递细胞的表面表达，并在这些细胞的功能中发挥作用（Arce 等，2004）。

▼ 克隆与表达

Arce等人通过使用DLEC的CRD（CLEC4C；606677）作为探针搜索数据库，然后对外周血单个核细胞总RNA进行RT-PCR（2004）克隆了 CLEC4D，他们将其称为 CLECSF8。预测的 215 个氨基酸的 II 型整合膜蛋白与小鼠蛋白有 63% 的同一性。CLEC4D 具有 21 个氨基酸的胞质尾部，随后是 20 个氨基酸的跨膜结构域和一个由 42 个氨基酸的茎区域（具有 3 个半胱氨酸）和一个 132 个氨基酸的 CRD（具有 3 个潜在的 N-糖基化位点）组成的胞外区域。CRD 与其他 C 型凝集素的 CRD 具有显着的同源性。RT-PCR 分析发现了一个潜在的 CLEC4D 剪接变体，编码缺乏 CRD 的蛋白质。Northern blot分析检测到骨髓和外周血白细胞中的1.2-和2.4-kb转录物，脾脏表情淡。造血细胞系的 RT-PCR 显示单核细胞、单核细胞衍生的巨噬细胞和单粒细胞系中 CLEC4D 的弱表达。在假单胞菌腹膜炎患者的腹膜巨噬细胞中检测到高表达，在类风湿性关节炎患者滑液中的巨噬细胞中检测到较低表达（RA；180300）。免疫荧光显微镜和流式细胞术显示转染细胞表面有CLEC4D表达。蛋白质印迹分析揭示了还原条件下的 30-kD 蛋白质，N-聚糖酶处理后的较小蛋白质，以及非还原条件下明显的多聚体。在假单胞菌腹膜炎患者的腹膜巨噬细胞中检测到高表达，在类风湿性关节炎患者滑液中的巨噬细胞中检测到较低表达（RA；180300）。免疫荧光显微镜和流式细胞术显示转染细胞表面有CLEC4D表达。蛋白质印迹分析揭示了还原条件下的 30-kD 蛋白质，N-聚糖酶处理后的较小蛋白质，以及非还原条件下明显的多聚体。在假单胞菌腹膜炎患者的腹膜巨噬细胞中检测到高表达，在类风湿性关节炎患者滑液中的巨噬细胞中检测到较低表达（RA；180300）。免疫荧光显微镜和流式细胞术显示转染细胞表面有CLEC4D表达。蛋白质印迹分析揭示了还原条件下的 30-kD 蛋白质，N-聚糖酶处理后的较小蛋白质，以及非还原条件下明显的多聚体。

▼ 基因结构

Arce 等人（2004）确定CLEC4D基因包含6个外显子。

▼

通过基因组序列分析进行绘图，Arce 等人（2004）将 CLEC4D 基因定位到染色体 12p13，端粒定位到 MINCLE 基因（CLEC4E; 609962），着丝粒定位到 DCIR 基因（CLEC4A; 605306）。

▼ 基因功能

通过 RT-PCR 分析，Arce 等人（2004）发现在与 IL6（147620）和其他细胞因子一起孵育的单核细胞衍生的巨噬细胞中，CLEC4D 表达被诱导，但它被脂多糖下调。流式细胞术和共聚焦显微镜分析表明交联诱导 CLEC4D 内化，表明它是一种内吞受体。阿尔塞等人（2004）提出 CLEC4D 在活化的单核细胞和巨噬细胞的抗原摄取中发挥作用。

C 型凝集素 MINCLE 是一种激活受体，可与 FcR γ 链偶联（参见 FCER1G；147139），并识别有效的分枝杆菌佐剂海藻糖-6,6-prime-dimycolate（TDM），也称为索因子。通过免疫印迹和原位杂交分析，Miyake 等人（2013）证明，在 TDM 暴露上调之前，Mincle 的表达在小鼠肺和骨髓来源的树突状细胞中检测不到，这表明另一种 TDM 受体可能促进 Mincle 的初始诱导。Mincle 的表达也依赖于 Fcer1g。使用 Mincle 碳水化合物识别域（CRD）内的抗 Mincle 抗体结合位点（VEGQW）进行的序列分析表明，该位点与小鼠 Mcl 共享，而小鼠 Mcl 也在肺中表达。小鼠和人类 MCL 均结合 TDM。Mcl 与 Mincle 不同，在小鼠骨髓细胞中组成型表达。暴露于 TDM 上调 Mincle，而 Mcl 表达保持稳定。流式细胞术和免疫共沉淀分析表明，与 Mincle 一样，Mcl 表达依赖于 FcR-γ，并且 Mcl 与 FcR-γ 的结合依赖于跨膜区的亲水残基 thr38。报告基因检测表明，小鼠 Mcl 在 TDM 反应中充当 FcR-γ 偶联激活受体。

朱等人（2013）在小鼠巨噬细胞系中表达了具有人 dectin-3、BDCA2（CLEC4C）、MINCLE 或 DCIR 细胞外结构域的嵌合受体，这些受体都属于 dectin-2 基因簇，并与人 dectin-2（CLEC6A; 613579）的跨膜和细胞内结构域融合。他们发现，dectin-3（而非其他 dectin-2 家族成员）充当白色念珠菌菌丝上 α-甘露聚糖的模式识别受体。用菌丝刺激 dectin-3/dectin-2 细胞会诱导 NFKB 的核转位（参见 164011）并引发 Syk（600085）磷酸化和 Ikba（NFKBIA; 164008）降解。缺乏dectin-3的小鼠对白色念珠菌感染高度敏感。与单独任一受体相比，dectin-2 和 dectin-3 的共表达增强了菌丝诱导的 NFKB 核转位。朱等人。

▼ 动物模型

三宅等人（2013）培育了健康的 Mcl 缺陷小鼠，发现它们的骨髓来源的树突状细胞，就像来自 Fcer1g 或 Mincle 缺陷的小鼠的树突状细胞一样，在 TDM 诱导的细胞因子产生中严重受损。注射 TDM 对于野生型小鼠来说是致命的。然而，在缺乏 Mcl 的小鼠中，与肺部炎症和肉芽肿形成相关的致死率被延迟和降低，并且缺乏 Fcer1g 或 Mincle 的小鼠对 TDM 注射完全抵抗。Mcl -/- 细胞中响应 TDM 的 Mincle 表达受到抑制。TDM 诱导的获得性免疫反应，例如实验性自身免疫性脑脊髓炎，几乎完全依赖于 Mcl，但不依赖于 Mincle。三宅等人（2013）得出结论，MCL 是一种 FCRG 偶联激活受体，介导 TDM 的佐剂作用。