聚合酶 III,RNA,G 亚基; POLR3G

  • RNA 聚合酶 III,32-KD 亚基;RPC32
  • RNA 聚合酶 III,32-KD 亚基,α
  • RPC32-α
  • RNA 聚合酶 III,亚基 C7;RPC7
  • DNA 定向 RNA 聚合酶 III,亚基 G

HGNC 批准的基因符号:POLR3G

细胞遗传学定位:5q14.3 基因组坐标(GRCh38):5:90,473,928-90,514,556(来自 NCBI)

▼ 描述

核 DNA 的转录由 RNA 聚合酶 Pol I、Pol II 和 Pol III 介导。Pol III 专门指导参与翻译、剪接和其他细胞过程的小非编码 RNA 的转录。POLR3G 和 POLR3GL(617457) 是替代的 Pol III 亚基(Haurie et al., 2010)。

▼ 克隆和表达

Wang 和 Roeder(1997) 从 HeLa 细胞 cDNA 文库中克隆了人类 POLR3G,他们将其称为 RPC32。推导的 233 个氨基酸蛋白质的计算分子量为 27 kD。RPC32 与其可能的酵母直系同源物 Rpc31 具有 25% 的同一性,并且两种蛋白都含有酸性 C 末端尾部。通过二维 PAGE 检测,RPC32 的表观分子量为 32 kD。

黄等人(2011) 发现小鼠 Polr3g 在未受精卵母细胞中不存在,但在受精卵和 2 细胞胚胎的细胞质中表达。核 Polr3g 首次在 8 至 16 细胞小鼠胚胎和囊胚中检测到。POLR3G 也在人胚胎干细胞(ESC) 和未分化诱导多能干细胞中检测到。

▼ 基因功能

Wang 和 Roeder(1997) 使用 4M 尿素或 0.5% 肌氨酰从纯化的人 RNA Pol III 的核心复合物中分离出一个亚复合物。除了 RPC62(POLR3C; 617454) 和 RPC39(POLR3F; 617455) 之外,该复合物还包含 RPC32。缺乏子复合物的核心复合物能够在转录延伸和终止中发挥作用,但不能准确地启动转录。天然亚复合物以及重建的重组 3 亚基亚复合物与起始因子 TFIIIB90(BRF1; 604902) 和 TATA 结合蛋白(TBP; 600075) 相互作用,当与核心 RNA Pol III 复合物结合时,恢复了准确的转录起始。

豪里等人(2010) 发现含有 RPC32-α 或 RPC32-β(POLR3GL) 亚基的纯化人 RNA Pol III 在转录 5S rRNA(RN5S1; 180420)、tRNA-met(参见 TRNAM1, 180621)、腺病毒相关 RNA 和 7SK RNA(RN7SK; 601515) 基因方面具有相当的活性。然而,通过短发夹 RNA 敲低人类细胞系中的 RPC32-α 或 RPC32-β 揭示了不同的细胞效应。Huh7肝癌细胞中RPC32-α的敲低几乎没有影响,而RPC32-β的敲低则显着降低了细胞生长并显着增加了细胞死亡。HeLa 细胞中 RPC32-α 的敲低减少了软琼脂中集落的形成。RPC32-α(而非 RPC32-β)的过表达增强了 IMR90 人成纤维细胞转化、集落形成和贴壁依赖性生长,并增强 Pol III 转录基因的表达。RPC32-α(而非 RPC32-β)的过表达也显着增加了与细胞存活、肿瘤生长和转移相关的几种 Pol III 转录基因的表达,同时减少了几种具有肿瘤抑制活性的基因的表达。豪里等人(2010) 得出结论,RPC32-β 是人 Pol III 一般形式的亚基,是细胞存活所必需的,并且 RPC32-α 在未分化的 ESC 和转化细胞中发挥作用。

Wong 等人使用短发夹 RNA(2011) 发现人类 ESC 中 POLR3G 的敲低会导致 Pol III 转录基因的上调和下调。POL3G 的敲除还会导致 ESC 多能性丧失,并促进 ESC 分化为中胚层、内胚层和外胚层谱系,并伴随基因表达的变化。POLR3G 的过度表达使 ESC 无法分化为胚状体。染色质免疫沉淀显示 OCT4(POU5F1; 164177) 和 NANOG(607937) 与 POLR3G 转录起始位点周围的推定调控序列结合。敲低 OCT4 或 NANOG,或抑制 ERK1(MAPK3;601795)/ERK2(MAPK1;176948),可显着下调 POLR3G 表达。

Renaud 等人使用免疫共沉淀和质谱分析(2014) 发现 POLR3G 和 POLR3GL 存在于单独的纯化 HeLa 细胞 Pol III 复合物中。POLR3G和POLR3GL在不同条件和不同细胞类型中表达差异,其中含有POLR3G的Pol III在分裂细胞中相对更丰富。然而,两者都与 POLR3D(187280) 相互作用并占据相同的靶基因。POLR3G 启动子(而非 POLR2GL 启动子)结合转录因子 MYC(190080)。

▼ 基因结构

Renaud 等人(2014)确定POLR3G基因有7个外显子。

▼ 测绘

Renaud 等人的地图(2014) 确定 POLR3G 基因与染色体 5p14.3 上的 MBLAC2 基因(LOC153364) 处于头对头的方向。