RAD9、RAD1 和 HUS1 相互作用的核孤儿 1; RHNO1

  • RHINO
  • 12 号染色体开放解读码组 32; C12ORF32

HGNC 批准的基因符号:RHNO1

细胞遗传学位置:12p13.33 基因组坐标(GRCh38):12:2,876,264-2,889,523(来自 NCBI)

▼ 克隆与表达

Kim 等人利用表达谱来鉴定在乳腺癌发生过程中上调的基因,然后对乳腺癌细胞进行 PCR(2010)克隆了C12ORF32。 数据库分析揭示了缺少外显子 2 的 C12ORF32 剪接变体,该外显子包含全长转录本中的起始密码子。 这个短转录本缺少长 ORF。 Northern 印迹分析检测到乳腺癌细胞中 1.9 kb 和 1.6 kb C12ORF32 转录物的强劲表达,而在正常组织(主要是睾丸、前列腺、卵巢、胸腺和小肠)中的表达要低得多。 乳腺癌细胞系的蛋白质印迹分析揭示了 16 kD C12ORF32 蛋白,而不是预测的 35 kD 全长蛋白。 这种 16-kD 蛋白似乎是全长 C12ORF32 的加工形式,仅包含 N 端氨基酸 1 至 144。C12ORF23 蛋白定位于间期细胞的细胞核,并且在有丝分裂时更广泛地分散。

Cotta-Ramusino 等人使用小干扰 RNA(siRNA) 筛选来鉴定 U2OS 骨肉瘤细胞中 DNA 损伤反应的成分(2011) 鉴定了 C12ORF32,他们将其称为 RHINO。 推导的 238 个氨基酸蛋白具有假定的 N 端 DNA 结合结构域和 3 个潜在的 ATM(607585)/ATR(601215) 磷酸化位点。

▼ 基因功能

金等人(2010) 发现通过 RNA 干扰消除乳腺癌细胞中的 C12ORF32 会抑制细胞生长,这可能是由于抑制了 G1/S 转变和随后的细胞死亡。

科塔-拉穆西诺等人(2011) 发现 RHINO 在 thr33 上被磷酸化,并在 U2OS 细胞中 DNA 损伤时定位于核灶。 通过 siRNA 敲低 RHINO 导致检查点绕过和对电离辐射、丝裂霉素 C 和喜树碱的敏感性。 RHINO 耗竭的程度与检查点和同源重组缺陷相关。 对用表位标记的 RHINO 免疫沉淀的蛋白质进行质谱和蛋白质印迹分析,鉴定出 RAD9(RAD9A; 603761)、RAD1(603153) 和 HUS1(603760),即 9-1-1 复合物的 3 个亚基。 9-1-1 复合物充当 DNA 损伤特异性夹子,结合 ATR 激活剂 TOPBP1(607760)、E3 泛素连接酶 RAD18(605256) 和 E2 缀合酶 UBC13(UBE2N; 603679)。 RHINO 假定的 N 端 DNA 结合结构域内的 7 个氨基酸基序的突变阻断了 RHINO 与 9-1-1 复合物的相互作用,但没有阻断 RHINO 与 TOPBP1 的相互作用,并干扰了 RHINO 在 DNA 损伤位点的定位。 科塔-拉穆西诺等人(2011) 得出结论,RHINO/9-1-1/TOPBP1 轴促进对 S 期病变发生的 DNA 损伤反应。

▼ 基因结构

金等人(2010) 确定 C12ORF32 基因包含 3 个外显子,其中第一个是非编码外显子。

▼ 测绘

Hartz(2011) 根据 RHNO1 序列(GenBank BC005106) 与基因组序列(GRCh37) 的比对,将 RHNO1 基因定位到染色体 12p13.33。