锌指蛋白样1
ZFPL1 是一种顺式高尔基体膜蛋白,与 GOLGA2(GM130; 602580 )相互作用以调节向高尔基体的转移并维持顺式高尔基体结构和功能的完整性(Chiu 等,2008)。
▼ 克隆与表达
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霍彭纳等人(1998)从人胰腺 cDNA 文库中克隆了 ZFPL1。推导出的 310 个氨基酸蛋白质的计算分子量为 34.1 kD,包含锌指样和亮氨酸拉链样基序,以及推定的二分核定位信号。人类 ZFPL1 与其小鼠直向同源物具有 91.3% 的氨基酸同一性。哺乳动物印迹分析揭示了绵羊、山羊、中国仓鼠、狗、马和牛的相关蛋白质。人类组织的 Northern 印迹分析仅在胰腺中检测到 1.4-kb ZFPL1 mRNA。RNA 原位杂交显示大鼠 Zfpl1 在胰腺外分泌细胞中表达。
邱等人(2008)指出 ZFPL1 在其 N 端区域包含 2 个假定的锌指结构域,其中第二个可能是无名指。它在其 C 端区域有一个推定的跨膜结构域。ZFPL1 在除酵母外的所有后生动物中都是保守的,在 N 端具有最高的同源性。EST 数据库分析表明 ZFPL1 在所有主要组织中均有表达。免疫荧光分析表明,Zfpl1 定位于 Vero 猴肾上皮细胞中的高尔基体。Zfpl1 的定位与顺式高尔基体基质蛋白 Golga2 的定位重叠,但与反式高尔基体网络蛋白 Tgoln2(TGN46;603062)的定位不重叠)。大鼠肝脏高尔基体膜的蛋白质印迹分析表明 Zfpl1 是一种完整的膜蛋白,大部分蛋白质位于细胞质面上。共价交联和 SDS-PAGE 显示 ZFPL1 以二聚体形式存在。
▼ 基因结构
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霍彭纳等人(1998)确定 ZFPL1 基因包含 8 个外显子,跨度为 3.9 kb。
▼ 测绘
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Hoppener 等人使用 PCR 和 BAC 分析(1998)将 ZFPL1 基因定位到染色体 11q13,在 ANG3(VPS51;615738 ) 和 ARL2( 601175 ) 基因之间。
▼ 基因功能
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邱等人(2008)将 ZFPL1 鉴定为经历有丝分裂磷酸化的高尔基体蛋白。共免疫沉淀和酵母 2-杂交实验表明 ZFPL1 的 N 末端直接与 GOLGA2 的 C 末端相互作用,并且相互作用需要 ZFPL1 的两个锌指基序,第一个锌指结构域可能是 GOLGA2 的主要结合位点. HeLa 细胞中的 ZFPL1 敲低不影响其他高尔基体或内质网(ER) 蛋白的表达,但它减少了高尔基体池的长度,将 GOLGA2 的定位从高尔基体带改变到细胞质点和中间区室,并增加了 GOLGA2 的管状结构-正结构。GOLGA2 定位到含有顺行病毒糖蛋白 VSV-G 的外周结构在 ZFPL1 敲低细胞中增加,并且传递到高尔基体和质膜的 VSV-G 量减少,表明 ZFPL1 的敲低抑制了从 ER 到高尔基体的转移。高尔基体分解后,耗尽 ZFPL1 的细胞重组了高尔基体堆栈,但不是有组织的高尔基体带,这表明高尔基体组装或结构完整性需要 ZFPL1。RNA 干扰拯救实验表明,ZFPL1 的两个锌指基序都需要拯救高尔基体组装表型。作者得出结论,ZFPL1 需要 ZFPL1 和 GOLGA2 之间的相互作用来维持高尔基体的完整性。表明高尔基体组装或结构完整性需要 ZFPL1。RNA 干扰拯救实验表明,ZFPL1 的两个锌指基序都需要拯救高尔基体组装表型。作者得出结论,ZFPL1 需要 ZFPL1 和 GOLGA2 之间的相互作用来维持高尔基体的完整性。表明高尔基体组装或结构完整性需要 ZFPL1。RNA 干扰拯救实验表明,ZFPL1 的两个锌指基序都需要拯救高尔基体组装表型。作者得出结论,ZFPL1 需要 ZFPL1 和 GOLGA2 之间的相互作用来维持高尔基体的完整性。