低密度脂蛋白受体 A 类含有蛋白 3

LDLRAD3 是一种 I 型跨膜蛋白，属于低密度脂蛋白（LDL） 受体家族。它参与了APP（104760）、ITCH（606409）和NEDD4（602278）的处理（Ranganathan 等人，2011 年；Noyes 等人，2016 年）。

▼ 克隆与表达

通过 EST 数据库分析，随后筛选出人脐静脉内皮细胞（HUVEC） cDNA 文库，Ranganathan 等人（2011）克隆了 LDLRAD3，他们称之为 LRAD3。推导出的全长 345 个氨基酸的蛋白质包含一个 N 端信号肽，其切割产生一个成熟的 328 个氨基酸的蛋白质，计算出的分子量为 36 kD。成熟的 LDLRAD3 具有胞外 N 端结构域、跨膜结构域和胞质 C 端结构域。胞外结构域包含 3 个 LDLa 重复序列和 2 个 N 连接的糖基化位点，胞质结构域包含用于内吞作用的双亮氨酸基序、4 个磷酸化位点和 2 个用于蛋白质-蛋白质相互作用的多脯氨酸序列。LDLRAD3 在斑马鱼、青蛙、鸡、小鼠和大鼠中是保守的。Northern印迹分析显示在人脑、肺、骨骼肌和胰腺中高表达约4.2-kb的转录物。在心脏、胎盘和肾脏中表达适中，并且在肝脏中不存在。LDLRAD3 也在 HUVEC 和 ECV-304 膀胱癌细胞中表达，在大隐静脉和主动脉平滑肌细胞中表达水平较低。一个较小的转录本，可能代表一个剪接变体，也在血管平滑肌细胞中表达。在转染的 COS-1 细胞中，LDLRAD3 定位于细胞表面，与 LRP1 的定位重叠。107770）。小鼠脑提取物的免疫印迹分析检测到大约 50-kD Ldlrad3 蛋白。Ldlrad3 在小鼠海马的所有 CA 层中均发现，在 CA1 层和齿状回中表达最高。Ldlrad3也在大脑皮层中发现，在皮层II至III和V层以及内侧缰核、脑桥核、内侧前庭核、小脑颗粒层以及一些浦肯野细胞和分子层细胞中表达最高。

▼ 基因功能

Ranganathan 等人使用转染的 COS-1 细胞（2011）发现 LDLRAD3 可以内化配体，尽管它的内吞率比 LRP1 低 8 倍。与其他 LDL 受体不同，LDLRAD3 不结合 RAP（ 104225 ）。在小鼠海马HT22细胞中，内源性Ldlrad3的表达与App（ 104760 ）的表达部分重叠，App与Lldrad3从小鼠脑提取物中共免疫沉淀。LDLRAD3 还与来自转染的 COS-1 细胞的 APP 特异性共免疫沉淀。固相结合测定表明 LDLRAD3 与 APP 的 C 末端特异性相互作用。LDLRAD3 与 APP 的相互作用不受 Fe65 的影响（APBB1; 602709），它与 ​​APP 和多脯氨酸区域相互作用，就像在 LDLRAD3 中发现的那样，并且 LDLRAD3 不与 Fe65 共免疫沉淀。用 LDLRAD3 转染 COS-1 或 CHO-13-5-1 细胞导致分泌的 APP 减少、A-β 肽的产生增加和 APP 周转率增加，但它不影响细胞 APP 的水平, 表明 LDLRAD3 在 APP 处理中起作用。

Noyes 等人在小鼠和人类细胞中使用下拉和免疫共沉淀实验（2016）表明 LDLRAD3 的细胞质结构域与 E3 泛素连接酶 ITCH、NEDD4 和 NEDD4L 相互作用（ 606384 ）。突变分析表明连接酶的WW结构域与LDLRAD3中的多脯氨酸序列相互作用。HEK293 细胞中 LDLRAD3 的表达导致 ITCH 和 NEDD4 蛋白降解增加，同时 ITCH 和 NEDD4 自身泛素化增加。抑制剂实验表明泛素化的 ITCH 被蛋白酶体降解。突变实验表明，对于 LDLRAD3 介导的 ITCH 泛素化和降解，LDLRAD3 的第二个多脯氨酸基序比第一个更重要。

▼ 测绘

兰加纳坦等人（2011）指出 LDLRAD3 对应到染色体 11p13。