肌球蛋白磷酸酶 RHO 相互作用蛋白; MPRIP

MRIP
KIAA0864
p116 RHO 相互作用蛋白；p116RIP
RIP3

HGNC 批准的基因符号：MPRIP

细胞遗传学位置：17p11.2 基因组坐标（GRCh38）：17:17,042,454-17,192,647（来自 NCBI）

▼ 克隆和表达

Gebbink 等人通过对小鼠脑 cDNA 文库进行酵母 2 杂交分析来分离 RhoA（165390）结合蛋白（1997）克隆了小鼠 Mprip，他们将其称为 p116Rip。推导的 1,024 个氨基酸蛋白质的计算分子量为 116.4 kD。它在 N 末端附近有 2 个富含脯氨酸的序列（预计可结合 SH3 结构域）、一个中央血小板-白细胞C 激酶底物同源（PH）结构域和一个与 RhoA 结合结构域重叠的 C 末端卷曲螺旋区域。Northern 印迹分析在所有检查的小鼠组织中均检测到 p116Rip。

Nagase 等人通过对从大小分级的人脑 cDNA 文库中获得的克隆进行测序（1998）克隆了 MPRIP，他们将其命名为 KIAA0864。推导的蛋白质含有1,218个氨基酸。RT-PCR ELISA检测到卵巢中MPRIP表达最高，其次是心脏、脑、肝脏、肾脏、肺、骨骼肌和睾丸，胰腺和脾中表达较低。

Surks 等人使用肌球蛋白磷酸酶的肌球蛋白结合亚基（MBS 或 PPP1R12A；602021）作为人类主动脉 cDNA 文库的酵母 2 杂交筛选中的诱饵（2003）克隆了 MPRIP，他们称之为 MRIP。推导的 1,024 个氨基酸蛋白与小鼠和大鼠 p116Rip3 具有 90% 的同一性。它在 N 端半部有 2 个 PH 结构域，侧翼有 2 个聚脯氨酸基序，在 C 端半部有 3 个卷曲螺旋结构域。它还具有肉豆蔻酰化和磷酸化位点，并且具有假定的核定位信号。冠状动脉平滑肌细胞的免疫组织化学分析表明，MRIP 与 MBS 和 RhoA 共定位于肌节蛋白应力纤维处。MRIP 未显示核定位。蛋白质印迹分析在人平滑肌细胞系中检测到表观分子质量为 125 kD 的内源性 MRIP。

▼ 基因功能

Gebbink 等人（1997）表明，小鼠 p116Rip 与小鼠神经母细胞瘤细胞系中 GDP 结合形式和 GTP 结合形式的 RhoA 相互作用。p116Rip 的过度表达以类似于显性失活 RhoA 的方式刺激细胞变平和神经突生长。过表达 p116Rip 的细胞未能响应溶血磷脂酸而缩回神经突。格宾克等人（1997）得出结论，p116RIP 对抗神经突生长中的 RhoA 信号传导。

穆德等人（2003）发现，小鼠 p116Rip 不是直接与 RhoA 结合，而是通过其 N 末端区域与丝状 F-肌节蛋白（参见 102610）相互作用。在小鼠和猴细胞系中，p116Rip 与动态 F-肌节蛋白结构（例如应力纤维、皮质微丝、丝状伪足和片状伪足褶边）共定位。p116Rip 通过其肌节蛋白结合域在体外诱导 F-肌节蛋白捆绑。然而，细胞培养物中 p116Rip 或其 N 末端肌节蛋白结合域的过度表达会破坏肌节蛋白细胞骨架，并干扰生长因子诱导的收缩性和片状伪足的形成。

Surks 等人使用免疫共沉淀分析（2003）证实人类 MRIP 与血管平滑肌细胞中的 MBS 相互作用。突变分析表明 MRIP 的第二个卷曲螺旋结构域与 MBS 的亮氨酸拉链结构域相互作用。在 COS-1 细胞中表达后，MRIP 还结合 GDP- 和 GTP-RhoA，并且这种相互作用不需要 MBS。MRIP 免疫沉淀还导致 PP1（PPA1; 179030）和 cGMP 依赖性蛋白激酶（PRKG1; 176894）的恢复，并通过其与 MBS 的相互作用间接与这些蛋白质相互作用。

Surks 等人利用人类血管平滑肌细胞的基因沉默（2005）表明，通过与 MBS 的相互作用，MRIP 将肌球蛋白磷酸酶靶向应激纤维，以调节肌球蛋白轻链的磷酸化（参见 160781）。MRIP 沉默导致血管平滑肌细胞发生显着的表型变化，包括应力纤维数量增加、细胞面积增加以及响应 Rho 激酶抑制剂的应力纤维抑制减少。苏克斯等人（2005）得出结论，MRIP 通过与肌球蛋白磷酸酶的相互作用来调节应力纤维的形成和血管平滑肌细胞形状。

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通过辐射混合分析进行绘图，Nagase 等人（1998）将 MPRIP 基因定位到 17 号染色体。