RIC1 同源物，RAB6A GEF 复合物伙伴 1； RIC1

连接蛋白 43 相互作用蛋白，150-KD；CIP150
RIC1，酿酒酵母，同源物
KIAA1432

HGNC 批准的基因符号：RIC1

细胞遗传学位置：9p24.1 基因组坐标（GRCh38）：9:5,629,029-5,778,632（来自 NCBI）

▼ 克隆和表达

Nagase 等人通过对从大小分级的胎儿脑 cDNA 文库中获得的克隆进行测序，（2000）克隆了 CIP150 的部分序列，他们将其称为 KIAA1432。RT-PCR ELISA 检测到所有人体组织和所检查的特定脑区域中存在低至中等表达。

Akiyama 等人使用 CX43（GJA1; 121014） C 末端尾部作为诱饵对大鼠卵巢 cDNA 文库进行酵母 2 杂交分析（2005）鉴定了与 Nagase 等人克隆的 KIAA1432 C 末端相同的部分 cDNA（2000）。通过数据库分析，然后对人胎盘 mRNA 进行 RT-PCR 分析，他们克隆了全长 CIP150。推导的 1,344 个氨基酸蛋白质的预测分子量为 150 kD。蛋白质印迹分析显示在人和大鼠肾细胞以及宫颈癌、人颗粒瘤和乳腺癌细胞系中表达。

帕特尔等人（2017）分析了胚胎、产后早期和产后晚期的小鼠晶状体微阵列数据集，并观察了各个阶段晶状体中 Ric1 的表达。除了在分离的晶状体上皮细胞中表达较高之外，Ric1 的表达相对较低。作者还检查了新生小鼠晶状体上皮和纤维细胞的 RNA-seq 数据，并观察到两种细胞类型中 Ric1 的表达，与上皮细胞相比，纤维细胞中的表达显着更高。

▼ Mapping

Hartz（2014）根据 CIP150 序列（GenBank AB037853）与基因组序列（GRCh37）的比对，将 CIP150 基因对应到染色体 9p24.1。

▼ 基因功能

Akiyama 等人使用免疫共沉淀实验（2005）表明CIP150与GJA1相互作用。GJA1 缺失构建体用于将 CIP150-GJA1 相互作用结构域对应到 GJA1 的氨基酸 227 至 242。GJA1 的这种相互作用结构域对于 GJA1 的磷酸化、细胞间接触的定位和染料转移活性也是必需的。当使用 RNA 干扰抑制 CIP150 的表达时，GJA1 不会定位于间隙连接斑块，并且间隙连接染料转移活性显着降低。

RAB6A（179513）是一种参与内体转移的晚期高尔基体小 GTP 酶。普萨帕蒂等人（2012）发现人 RGP1（615742）和 1,344 个氨基酸的 RIC1 亚型孤立地与 GDP 结合的 RAB6A 相互作用，但两者都不能单独充当 RAB6A 的鸟嘌呤核苷酸交换因子（GEF）。相比之下，RIC1 和 RGP1 的共表达产生了 RIC1-RGP1 复合物，该复合物对 RAB6A 显示出浓度依赖性 GEF 活性，但对其他测试的 RAB 蛋白则没有。人类细胞系中 RIC1 或 RGP1 的缺失会导致 RAB6A 蛋白不稳定，并降低其在高尔基复合体中的丰度，同时阻碍 RAB6A 依赖性甘露糖 6-磷酸受体（IGF2R；147280）从晚期内体到高尔基体的逆行转运。RIC1 还表现出结合内侧高尔基体定位的 RAB33B（605950）的能力，

帕特尔等人（2017）利用公开的蛋白质-蛋白质相互作用数据和 iSyTE 晶状体基因表达数据的叠加进行了综合分析。从 RIC1 基因的总共 39 个直接蛋白质-蛋白质水平连接中，32 个候选蛋白在晶状体中表达，其中 14 个是晶状体富集的。

Unlu 等人使用抗体标记（2020）观察到，ric1 缺陷的斑马鱼软骨细胞在细胞内保留了原胶原 II（参见 120140），其表面积比对照细胞大约 10 倍，对照细胞将原胶原分泌穿过质膜到达细胞外基质（ECM）。在成纤维细胞样脊索鞘细胞中也观察到类似的结果，脊索基底膜畸形。注意到其他货物通常被贩运，作者得出结论，Ric1 是前胶原转移选择性需要的，并且软骨细胞克隆实验表明这是一种细胞自主的要求。ric1 缺失软骨细胞的透射电子显微镜（TEM）显示出野生型软骨细胞中未见的不同大小的囊泡。高放大倍数图像显示大囊泡核心中有条纹材料，让人想起通常在 ECM 中形成的胶原纤维。软骨基质分析显示，在受精后 3 天（dpf）时，ric1 缺失 ECM 中的交联减少，而在 4 dpf 时则消失。因此，TEM 数据证实了 ric -/- 细胞中胶原蛋白的细胞内保留以及 ECM 超微结构的受损。

恩卢等人（2020）生成了嵌合 rgp1 耗尽的斑马鱼胚胎，并观察到类似于 ric1 缺失突变体的骨骼表型。此外，rpg1 -/- 克隆显示出与 ric1 -/- 软骨细胞相似的胶原蛋白积累。这些结果支持了 RGP1 和 RIC1 共同作用调节前胶原分泌和骨骼形态发生的假设。RAB6A 的过度表达不足以挽救 ric1 -/- 细胞中的胶原蛋白转移，而组成型活性 RAB6A 突变体的过度表达可将胶原蛋白积累清除至野生型水平，表明 RAB6A 激活是胶原蛋白分泌所必需的。

▼ 分子遗传学

Patel 等人对来自 74 个家庭的 166 名白内障患者进行了队列研究（2017）鉴定了 2 名不相关的患有整体发育迟缓和小头畸形的患者，有或没有唇/腭裂（CATIFA; 618761），他们的 RIC1 基因具有相同的错义突变（R1265P; 610354.0001），他们是纯合子。

恩卢等人（2020）重新研究了 Patel 等人最初报道的 2 个阿拉伯家庭（2017）总共鉴定了 8 名患有唇裂、白内障、牙齿异常、智力发育受损、面部畸形和注意力缺陷多动障碍（ADHD）的儿童，他们将其命名为 CATIFA 综合征，这些儿童的 RIC1 基因中的 R1265P 突变是纯合的。在斑马鱼和患者细胞中进行的实验表明，RIC1 缺失会导致前胶原分泌中断。

▼ 动物模型

Patel 等人（2017）分析了晶状体发育缺陷的不同基因敲除小鼠突变体中的 Ric1 表达，发现在胚胎（E） 9.5 和 E10.5 天的 Pax6（607108）敲除晶状体中 Ric1 表达下调，而在 Sparc（182120）缺失晶状体上皮细胞中 Ric1 表达上调。

恩卢等人（2020）对斑马鱼颅面“圆形”基因座进行了基因定位和定位克隆，并鉴定了 ric1 基因的突变。斑马鱼 ric1 -/- 突变体幼虫在受精后 5 天（dpf）时表现出头部扁平、下巴缺乏突出、胸鳍扭结和头/体长指数短。与年龄匹配的野生型对照相比，突变斑马鱼的头部尺寸指数更小。糖胺聚糖染色显示突变体中畸形的颅面软骨元件和骨化中心，也比野生型对照小。此外，与野生型幼虫相比，突变幼虫在 7 dpf 时缺乏咽齿，并且具有较小的钙化区域，无法伸长。3维重建的共焦显微镜显示，与对照组相比，突变体的股辛软骨臂和体更厚且畸形，并且孔塌陷。高放大倍数成像显示出更小的、收缩的突变软骨细胞，并且失去了特征性的硬币堆叠形状。作者得出结论，Ric1 功能是正常细胞形状所必需的，细胞形状传达器官形状并最终表达整体颅面形态。恩卢等人（2020）还通过整体免疫荧光（WMIF）分析了肌纤维附着质量，并观察了下颌间后肌和躯干肌肉中的波状回缩肌纤维。TEM 证实了肌原纤维的不连续性，揭示了缺乏周期性肌丝图案和排列。对 ric1 缺失斑马鱼幼虫的运动分析显示，与野生型斑马鱼幼虫相比，其探索行为较少，且运动速度明显较慢。作者得出结论，ric1 缺乏会导致结构和功能性肌肉骨骼缺陷。使用全神经元标记的 WMIF 显示突变斑马鱼的前脑和小脑明显变小，轴突投影也发生改变，这表明 ric1 的缺失也会导致神经系统的形态和功能缺陷。作者指出，上述发现与 RIC1 缺陷相关的人类表型特征相关（参见分子遗传学）；然而，尽管大多数患者也表现出白内障，但他们没有观察到 ric1 缺失的斑马鱼晶状体存在缺陷。作者得出结论，ric1 缺乏会导致结构和功能性肌肉骨骼缺陷。使用全神经元标记的 WMIF 显示突变斑马鱼的前脑和小脑明显变小，轴突投影也发生改变，这表明 ric1 的缺失也会导致神经系统的形态和功能缺陷。作者指出，上述发现与 RIC1 缺陷相关的人类表型特征相关（参见分子遗传学）；然而，尽管大多数患者也表现出白内障，但他们没有观察到 ric1 缺失的斑马鱼晶状体存在缺陷。作者得出结论，ric1 缺乏会导致结构和功能性肌肉骨骼缺陷。使用全神经元标记的 WMIF 显示突变斑马鱼的前脑和小脑明显变小，轴突投影也发生改变，这表明 ric1 的缺失也会导致神经系统的形态和功能缺陷。作者指出，上述发现与 RIC1 缺陷相关的人类表型特征相关（参见分子遗传学）；然而，尽管大多数患者也表现出白内障，但他们没有观察到 ric1 缺失的斑马鱼晶状体存在缺陷。表明 ric1 的缺失也会导致神经系统的形态和功能缺陷。作者指出，上述发现与 RIC1 缺陷相关的人类表型特征相关（参见分子遗传学）；然而，尽管大多数患者也表现出白内障，但他们没有观察到 ric1 缺失的斑马鱼晶状体存在缺陷。表明 ric1 的缺失也会导致神经系统的形态和功能缺陷。作者指出，上述发现与 RIC1 缺陷相关的人类表型特征相关（参见分子遗传学）；然而，尽管大多数患者也表现出白内障，但他们没有观察到 ric1 缺失的斑马鱼晶状体存在缺陷。

▼ 等位基因变异体（1 个选定示例）：.

0001 CATIFA 综合征
RIC1、ARG1265PRO
在来自多个近亲家庭的 2 名不相关患者（07DG0035/10DG1320 和 15DG2427）中，患有白内障综合症，与整体发育迟缓和小头畸形相关，伴有或不伴有唇裂和唇裂吃（CATIFA；618761），Patel 等人（2017）鉴定了 RIC1 基因中 c.3794G-C 颠换（c.3794G-C, NM_020829.3）的纯合性，导致 arg1265 到 pro（R1265P）取代。患者共有 1 个自合间隔，证实了突变的创始人性质。

恩卢等人（2020）重新研究了 Patel 等人最初报道的 2 个阿拉伯家庭（2017）并鉴定出总共 8 名患有 CATIFA 综合征的儿童，他们的 RIC1 基因 R1265P 突变是纯合的。该突变在两个家庭中都与疾病完全分离，受影响儿童的近亲父母都是该突变的杂合子，而未受影响的同胞要么是杂合子，要么不携带该突变。对患者成纤维细胞的 cDNA 进行测序揭示了两种类型的转录本：第一种包括 R1265P 突变，随后正确剪接了内含子 24，而第二种则携带 R1265P 突变，但由于内含子保留而未能剪接，导致在 1266 位出现终止密码子。定量 PCR 表明，患者成纤维细胞的 RIC1 转录物数量不到对照细胞的一半，表明非剪接转录物发生了降解。患者来源的成纤维细胞的透射电子显微镜（TEM）显示出在对照成纤维细胞中未见的扩张的囊泡区室，并且与对照相比，免疫荧光显示整个患者成纤维细胞中的 COL1（参见 120150）染色显着扩大。跨高尔基体网络（TGN）标记部分与 COL1 染色共定位，表明原胶原转运在 TGN 处被阻断。ric1 -/- 斑马鱼细胞中野生型 RIC1 的过度表达可以挽救细胞内胶原蛋白的积累，而 R1265P 突变体的马赛克过度表达只能部分清除胶原蛋白沉积物。