NINEIN-LIKE 蛋白; NINL

NLP
KIAA0980

HGNC 批准的基因符号：NINL

细胞遗传学定位：20p11.21 基因组坐标（GRCh38）：20:25,452,697-25,585,531（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

Nagase 等人（1999）通过对从大小分级的脑 cDNA 文库中获得的克隆进行测序，克隆了 NINL，他们将其称为 KIAA0980。推导的1,406个氨基酸的蛋白质与小鼠ninein（NIN;）有29.5%的氨基酸一致性。608684）。RT-PCR 检测到所有组织和特定脑区域中 KIAA0980 的表达。肾脏中的表达最高，心脏、肺、肝脏和骨骼肌中的表达最低。

Caseenghi等人（2003）分析了KIAA0980编码的蛋白质，他们将其称为NLP。NLP包含2个N端EF手Ca（2+）结合结构域，随后是3个中央卷曲螺旋结构域和一个更大的C端卷曲螺旋结构域。NLP 中不存在 Ninein 中的 GTP 结合位点。NLP 的 N 端一半与 Ninein 相似度最高，有 8 个潜在的 PLK1（602098）磷酸化位点。人类细胞系的免疫荧光显微镜检测到中心体的 NLP，其染色与 γ-微管蛋白的染色基本重叠（参见 TUBG1；191135）。NLP 似乎集中在主要围绕 2 个中心粒之一的不同点上。Western blot 分析检测到 NLP 的表观分子质量为 156 kD。

van Wijk等人（2009）通过以lebercilin（611408）和USH2A（608400）为诱饵对人视网膜cDNA文库进行酵母2-杂交分析，鉴定出一个NINL剪接变体，他们将其称为NLP（isoB）。全长 NINL，他们称为 NLP（isoA），包含 1,382 个氨基酸，而较短的亚型 B 包含 1,033 个氨基酸，并且缺少外显子 17，导致在残基 734 之后跳过 349 个氨基酸。NLP（isoB）包含一个 C -末端中间丝结构域并且缺少第三和第四卷曲螺旋结构域。对人体组织的 RT-PCR 分析显示，两种异构体的分布相似，在胎儿耳蜗和成人大脑、睾丸、肾脏和视网膜中表达最强。

▼ 基因功能

Caseenghi等人（2003）发现NLP与γ-微管蛋白环复合物的2种成分，γ-微管蛋白和GCP4（609610）相互作用。NLP 刺激微管成核，通过抗体显微注射抑制内源性 NLP 导致细胞缺乏可检测到的微管紫苑。Caseenghi等人（2003）将NLP鉴定为PLK1底物，并发现PLK1对NLP的磷酸化破坏了其中心体关联及其与γ-微管蛋白的相互作用。缺乏 PLK1 磷酸化位点的 NLP 突变体能够招募 γ-微管蛋白并刺激微管成核，但它无法从中心体解离，导致异常的有丝分裂纺锤体形成。Caseenghi et al.（2003）得出结论，有丝分裂开始时PLK1的激活触发了NLP从中心体的移位，从而允许建立具有增强的微管成核活性的有丝分裂支架。

van Wijk et al.(2009)通过使用lebercilin和USH2A亚型B胞内区域的缺失构建体进行酵母2-杂交分析，发现NLP的中间丝区域（isoB）与lebercilin和USH2A（isoB）相互作用，而NLP的中间丝区域（isoB）与lebercilin和USH2A（isoB）相互作用，而NLP的中间丝区域（isoB）与lebercilin和USH2A（isoB）相互作用。 NLP（isoA）检测到相互作用。免疫共沉淀和 GST Pull-down 实验证实了 NLP（isoB）与 lebercilin 和 USH2A 之间存在相互作用。重组NLP（isoB）、lebercilin和USH2A（isoB）均被发现共定位于人视网膜色素上皮（ARPE-19）细胞的中心体。用针对所有 3 种蛋白质的特异性抗体对成年大鼠视网膜切片进行染色，揭示了它们在光感受器连接纤毛的基体上的共定位。lebercilin 的截短突变（611408.0003）减少了与 NLP（isoB）的相互作用和共定位；然而，在纤毛 ARPE-19 细胞中，RNAi 敲除内源性 NLP 和 lebercilin 并不会导致 NLP 或 lebercilin 的蛋白质定位发生改变。

▼ 测绘

Nagase等（1999）通过辐射杂交分析将NINL基因定位到染色体20。