三叶因子 1, TFF1 - 乳腺癌雌激素诱导序列

三叶蛋白,例如 TTF1,是稳定的分泌多肽,其特征是存在至少 1 个包含 3 个保守二硫键的 40 个氨基酸基序的拷贝。

▼ 克隆与表达
贾科卢等人。(1984)提供了从人乳腺癌细胞系 MCF-7 中分离的人 pS2 cDNA 的完整核苷酸序列。预测的蛋白质有 84 个氨基酸。

通过 Northern 印迹分析,Tomasetto 等人。(1990)发现 pS2 和 SP 在正常人胃上皮中均有表达。他们指出,在大约 50% 的人类乳腺肿瘤中检测到 pS2 mRNA 和蛋白质表达。汉比等人。(1993)发现人类 pS2 和 SP mRNA 以及 pS2 肽共定位于整个胃的胃小凹和表面上皮。基于 pS2 和 SP 的分布,作者认为两者都可能参与修复增强机制。

Itoh 等人使用 RT-PCR 和 cDNA 末端快速扩增的组合。(1996)从胃中克隆并测序了大鼠 pS2 cDNA。推导出的氨基酸序列与人和小鼠 pS2 蛋白的氨基酸序列非常相似。然而,除了三叶基序的高度保守的半胱氨酸残基外,该氨基酸序列与其他大鼠三叶肽如SP(Tff2)和肠三叶因子(Itf或Tff3)的氨基酸序列有很大不同。Northern印迹表明大鼠pS2在胃和十二指肠中表达,但不在远端小肠、大肠、直肠、脑、肝、睾丸或其他组织中表达。

▼ 基因功能
罗伯茨等人。(1988)证明 pS2 基因在 MCF-7 细胞中被雌激素转录诱导。从 -3000 到 +10 个碱基对的 5 级侧翼序列似乎在Roberts 等人使用的系统中充当雌激素诱导型启动子。(1988)。

Metivier 等人使用染色质免疫沉淀分析。(2003)鉴定了由 ESR1 ( 133430 ) 在雌二醇治疗后的乳腺癌细胞系中募集到 pS2 启动子的蛋白质复合物,并且他们确定了募集复合物的顺序。

伊藤等人。(1996)检查了在醋酸诱导的结肠炎过程中大鼠 pS2、大鼠 SP 和大鼠 Itf 的表达。他们在结肠炎的急性期检测到 pS2 mRNA,但在恢复期或正常对照中没有检测到。

通过将常规生化方法与质谱法相结合,Chutipongtanate 等人。(2005)发现正常人尿液中的 TFF1 抑制草酸钙晶体的生长。尿液 TFF1 显示出类似于肾钙素的抑制效力,并且抑制作用是剂量依赖性的,并且被 TFF1 抗血清抑制,特别是被针对 TFF1 C 末端的抗血清抑制。特发性草酸钙肾结石患者尿液中 TFF1 的浓度和相对量显着低于对照组。Chutipongtanate 等。(2005)提出了一个模型,其中 TFF1 的 4 个 C 端谷氨酸残基与钙离子相互作用以防止草酸钙晶体生长。

Metivier 等人。(2008)提出了 DNA 甲基化在人类细胞基因调控中的意外动态作用的证据。周期性的、链特异性甲基化/去甲基化发生在 pS2/TFF1 基因启动子被雌激素激活的转录循环过程中。DNA 甲基转移酶在这些循环中表现出双重作用,参与 CpG 甲基化和 (5m)CpG 通过脱氨基作用的主动去甲基化。该过程的抑制阻止了 pS2 基因启动子的去甲基化及其随后的转录激活。Metivier 等人。(2008)得出的结论是,启动子 CpG 甲基化状态的循环变化可能代表转录实现中的关键事件。

Kangaspeska 等。(2008)独立表明,CpG 二核苷酸的循环甲基化和去甲基化,周期约为 100 分钟,是人类细胞中 5 个选定启动子的特征,包括雌激素 (E2) 响应 pS2 基因。当pS2的基因活跃转录,DNA甲基化的雌激素受体-α的循环占用后发生(ESRA; 133430)和RNA聚合酶II(见180660)。此外,Kangaspeska 等人。(2008)报道了在 pS2 表达静止且近端启动子被甲基化的细胞系中引发 pS2 启动子甲基化循环的条件。这与 ER-α 和 pS2 转录物的低水平再表达相吻合。

▼ 基因结构
Jeltsch 等人。(1987)报道人类 pS2 基因由 3 个外显子组成,长度小于 5 kb。

▼ 映射
BCEI 基因被分配到 21 号染色体(Cohen-Haguenauer 等,1985;Moisan 等,1985)。此外,Moisan 等人。(1985)原位杂交表明该基因位于片段21q22.3,这是唐氏综合症的关键片段。他们还展示了 BamHI 的 RFLP。莫伊桑等人。(1988)使用一组体细胞杂交系将基因定位到 21 号染色体。他们描述了 BstE2 RFLP。沃特金斯等人。(1987)发现 BCEI 基因与位于 21q22.3 的 2 个 DNA 标记密切相关(theta = 0.0,两者的对数得分都很高)。

塞布等人。(1997)发现 pS2、TFF2 ( 182590 ) 和 TFF3 ( 600633 ) 基因聚集在一个跨越 55 kb 的区域内。May 和 Westley (1997)确定 TFF1 和 TFF2 基因之间的物理距离仅为 12.5 kb。这两个基因似乎是由基因复制产生的。TFF1 和 TFF2 基因具有相似的表达模式,表明它们可能共享共同的调控元件。

▼ 动物模型
为了阐明通常在胃粘膜中表达并存在于上皮细胞质中的 pS2 三叶肽的功能,Lefebvre 等人。(1996)通过同源重组破坏了小鼠 pS2 基因。他们证明 mpS2 +/+ 小鼠和 mpS29 +/- 小鼠分别表达了高水平和中等水平的 mpS2 蛋白,而 mpS -/- 小鼠没有显示出可检测的表达。当杂交时,mpS2 -/- 小鼠是可育的,并且没有胚胎致死的证据。对 mpS2 -/- 小鼠组织的组织学检查显示,除胃外,其他器官均正常。在 3 周大的幼崽中,胃窦和幽门粘膜更厚。在第 5 个月时,所有检查的 mPS2 -/- 小鼠都表现出环绕整个胃幽门粘膜的圆周腺瘤。衬在表面的上皮细胞和细长的粘膜凹坑显示高度发育不良。在 30% 的 5 个月大的 mpS2 -/- 小鼠中,在腺瘤内观察到 2 到 5 个癌灶。Lefebvre 等人。(1996)报道 mpS2 -/- 小鼠小肠中的固有层 (LP) 变厚并含有炎症细胞。肠绒毛内衬的上皮细胞正常。作者认为 pS2 蛋白可能发挥保护功能,并且它的缺失可能导致肠粘膜屏障缺陷,并伴有局部淋巴组织增生反应。由于所有 mpS2 -/- 小鼠都发展为胃腺瘤,但只有 30% 发展为胃癌,Lefebvre 等人。(1996)得出结论,pS2 蛋白的损失可能不足以导致恶性肿瘤。他们指出,大约 50% 的人类胃癌已经失去了 pS2 的表达,并且已经从胃癌中分离出了异常的 pS2 转录本。

标签: 乳腺癌

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