RH血型

临床上重要的恒河猴（RH）血型系统包含数量最多的抗原和大约 30 个已知血型系统中最复杂的遗传学。RH 血型抗原由属于铵转运/甲基铵渗透酶超家族的 RHD 和 RHCE 蛋白表达。Flegel（2011）指出，在报告时，Rh 系统中有 51 种抗原。已经报道了超过 200 个 RHD 等位基因，并根据血清学和分子特征进行分组。

Rh血型系统的抗原由2个基因编码。RHD 基因编码 D（Rh1）抗原，RHCE 基因编码 C、c、E 和 e（Rh2 至 Rh5）抗原。在红细胞（RBC）膜中，Rh 蛋白与 Rh 相关糖蛋白（RHAG; 180297 ）形成复合物；Rh 的膜表达取决于功能性 RhAG。这种 Rh 复合物与细胞骨架紧密相连，据信对其适当的结构很重要（Wagner 和 Flegel 的总结，2004 年）。

Avent 和 Reid（2000）对 Rh 血型系统进行了全面审查。

▼ 临床特点
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有关 Rh 诱发的胎儿和新生儿溶血病的讨论，请参见619462。

“弱 D”和部分 D 表型

大约 0.2% 至 1% 的白人红细胞 D 抗原表达降低，称为弱 D，以前称为 D（u）。一小部分弱 D 样本可以通过质量改变的 RhD 蛋白来解释，称为部分 D。另一部分是由 Cde 单倍型在转位中的抑制作用引起的。这些弱 D 很可能具有正常的 RHD 等位基因，因为携带者的父母和孩子经常表达正常的 RhD 抗原密度。如此弱的 D 仅显示 RhD 抗原表达的轻微减少，曾被松散地称为“高等级 D（u）”，并且通常被归类为正常 RhD，因为与以前可用的检测方法相比，检测方法的灵敏度更高。

携带“部分”D 抗原的 D 阳性个体可能会产生与 D 阴性个体产生的类似的同种异体抗 D。在欧洲人中，所有已知部分 D 表型的人口频率组合不到 1%。分子基础通常是基因转换，其中部分 RHD 基因被 RHCE 基因的各个片段和单个错义突变取代。然而，非洲人的情况更为复杂，因为在 D 阳性个体中出现异常的 RHD 等位基因和抗 D 免疫接种比欧洲人更频繁（du Toit 等，1989）。瓦格纳等人（2002）描述了 5 个 RHD 等位基因，指定为 DAU-0 至 DAU-4，它们共享 thr379-to-met（T379M）替换。四个等位基因表达部分 D 表型，其特征是缺乏不同的 D 表位或抗 D 免疫事件。瓦格纳等人（2002）提供了详细的 RHD 系统发育，其中变异等位基因形成了一个以前未知的簇，与弱 D.

埃文斯表型

黄等人（1996）描述了 Evans（也称为“D..”）表型的家族研究，这是一种与 D 抗原表达的定性和定量变化相关的共显性性状。该家族还遗传了导致白内障的突变，并且显然与 Evans 共同遗传，这表明这 2 个不相关的性状在染色体上存在关联。Southern 印迹分析和等位基因特异性 PCR 显示 Evans 与 SphI RFLP 标记的连锁以及 RH 基因座中存在杂交基因。为了描绘基因表达的模式，Huang 等人（1996）通过 RT-PCR 和核苷酸测序表征了 RH 多肽转录物的组成和结构。他们鉴定了一种仅在 Evans 阳性红细胞中表达的新型 Rh 转录物。序列分析表明，Evans 由一种独特的杂交 mRNA 物种编码，其内部部分很可能来自 D 基因，并指出在 RH 基因座上发生了基因重组事件（参见 MOLECULAR GENETICS）。Volkmann 型先天性白内障（CCV; 115665 ）已被定位到 RH 区域，特别是 1pter-p36.13。Huang等人研究的家庭（1996）通过位于苏格兰邓迪的苏格兰东部输血服务中心确定（ Huang, 1996 ）。

Race和Sanger（1975）参考了Wiener在1966年未发表的对英国家族Evans抗原的观察结果。针对Evans抗原的抗体导致Evans家族新生儿溶血病。在原始家庭之外，随机在 480 名英国人中发现了一个埃文斯阳性个体。原始家族的所有 4 个 Evans 阳性成员都有一个类似但不完全相同的 Rh 复合体，--D--，而所有 3 个 Evans 阴性血亲都没有。Evans 抗体不与真正的-D--纯合子或杂合子的细胞发生反应。

▼ 诊断
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血型分型

黄等人（1996）使用一组与 Rh 结构基因紧密相连的 SphI RFLPs 来证明连锁不平衡，允许确定 Rh 阳性或 Rh 阴性状态（D/D、D/d 和 d/d）。

在长期输血的患者中，由于混合场凝集，常规血型分型可能是不可能的（Spanos 等人，1990 年；Garratty，1997 年）。莱格勒等人（1999）对 27 名有先天性贫血和终生输血史的患者进行了 D、RHD 和 RHCE 的 PCR 基因分型，并将结果与他们病历中的血清学血型分型结果进行了比较。他们发现血清学方法经常导致混合血样中的假血型结果。此外，血型测定经常不完整或可疑。在这种情况下，D、RHD 和 RHCE 的输血前基因分型使 Rh 匹配的输血成为可能，至少在白人中是这样。在可以不受限制地应用基因分型之前，必须在其他种族中阐明 RH 基因的遗传背景。

▼ 测绘
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苏托等人（2000）通过对淋巴细胞释放的 DNA 纤维进行 2 色荧光原位杂交（纤维-FISH）并使用 RHCE 和 RHD 基因的内含子 3 和 7 的 DNA 探针分析了 RH 基因的组织。6 个 Rh 阳性样本（2 个具有 D+C-c+E+e-，2 个具有 D+C+cE-e+，2 个具有 D+C+c+E+e+ 表型）显示存在2 个 RH 基因位于小于 200 kb 的区域内。非常有趣的是发现基因从端粒开始以逆向顺序排列：tel--RHCE（5-prime 到 3-prime）--RHD（3-prime 到 5-prime）--着丝粒。另一方面，正如预期的那样，2 个典型的 Rh 阴性样本（DC-c+E+e+）显示仅存在 1 个 RHCE 基因。

Wagner 和 Flegel（2000）表明 RH 基因座代表一个基因簇：RHD（ 111680 ）和 RHCE 通过它们的 3-prime 尾端相互面对，第三个基因SMP1（ 605348 ）散布在 2 个恒河猴基因之间. RHD 基因缺失可以通过不等的交叉事件得到简洁的解释。RH 基因的相反方向可能促进两个恒河猴基因之间的基因转换，这将解释杂交等位基因的高频率。

▼ 群体遗传学
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在高加索 RhD 阴性个体中，除Hyland 等人外，任何研究人员均未发现 RHD 基因（1994）。在日语中，奥田等人（1997）发现虽然 27.7% 的 RhD 阴性供体证明了该基因的存在，但其他人则显示了 RHD 基因的整体或部分缺失。此外，通过对 RhD 多肽 cDNA 和 RHD 基因启动子区域的测序，在 RhD 阴性供体中检测到的 RHD 基因似乎是完整的。这些具有 RHD 基因的供体的表型是 CC 或 Cc，但不是 cc。日本人和白种人之间 RhD 阴性供体中 RHD 基因的差异数据似乎源于 RhD 阴性和 RhC 阳性表型频率的差异。将研究这些差异可能与恒河猴血型相关糖蛋白 Rh50 共分子的差异有关的可能性。

▼ 分子遗传学
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Cartron 和 Agre（1993）回顾了 Rh 血型抗原的蛋白质和基因结构。总之，Rh 阳性者有 2 个 Rh 基因，1 个编码携带 Cc 和 Ee 的蛋白质或更可能是蛋白质，第二个编码携带 D 的蛋白质，而 Rh 阴性者只有 1 个 Rh 基因，上面描述的 2 中的第一个。

根据红细胞表面主要 D 抗原的存在与否，将个体分为 Rh 阳性和 Rh 阴性，但已经确定了超过 46 种其他抗原，包括 CcEe 系列的抗原（Issitt， 1989 年）。

Mollison（1994）回顾了 Rh 血型系统的遗传基础，简要回顾了早期历史。

卡顿（1994）提供了对 Rh 血型抗原的分子遗传学的全面审查。这些抗原由 30 至 32 kD 的非糖基化疏水跨膜蛋白家族携带，罕见的 Rh 基因缺失个体的红细胞中缺少这些蛋白。Rh 蛋白是红细胞特异性的，与任何已知蛋白没有序列同源性。RhD 和非 D 蛋白表现出 92% 的序列同一性。RHD 和 RHCE 基因在 1p36-p34 上串联排列，推测起源于共同祖先基因的复制。这一概念得到了在非人类灵长类动物中鉴定 RH 样基因的支持。C/c 和 E/e 蛋白可能是通过前信使 RNA 的选择性剪接产生的；大多数 RhD 阴性单倍型代表不存在 RHD 基因而仅存在 1 个结构基因 RHCE。111700.0002 ）和 pro226-to-ala 用于 E/e 特异性（ 111700.0001 ）。基因转换似乎是造成 RH 系统中多态性和基因多样性的主要机制；然而，也发现了基因缺失。

具有 D-- 表型的个体在 D 抗原存在时缺乏 C 样和 E 样反应性。肯普等人（1996）检查了 5 个不相关的 Rh D-纯合子，发现其中 4 个的 RHCE 序列已被 Rh D 序列取代。这些重排的 5-prime 末端都发生在外显子 2 周围 4.2-kb 的间隔内。然而，重排基因的 3-prime 末端存在异质性，表明它们在血统上并不相同，而是孤立的重组事件发生在一个小的基因组间隔内。肯普等人（1996）指出，1 个人研究（HD）表达非常低频率的埃文斯（D..）红细胞抗原，因此应严格归类为埃文斯。

在一个具有 Evans 红细胞表型（D..） Huang 等人的家庭中（1996）鉴定了一种仅在 Evans 阳性红细胞中表达的新型 Rh 转录物。序列分析表明，转录物保持正常的开放解读码组，但作为 CE-D-CE 复合物出现，其中 RHCE 基因的外显子 2-6 被 D 基因的同源对应物取代。预计该杂交基因编码 CD-D-CE 融合蛋白，其表面表达与 Evans 表型相关。这种事件重组的模式和后果表明，在 RH 基因座中，通过基因转换机制发生了片段 DNA 转移，尽管不能正式排除通过双交换的不等同源重组。

瓦格纳等人（1999）对来自德国西南部的 161 个被鉴定为弱 D 的血液样本中的 RHD 基因的所有 10 个外显子及其剪接位点进行了测序。总共鉴定了 16 种不同的分子弱 D 类型加上 2 个具有部分 D 特征的等位基因。弱 D 型的氨基酸置换位于细胞内和跨膜蛋白片段中，并聚集在蛋白质的 4 个区域（氨基酸位置 2 至 13、约 149、氨基酸 179 至 225 和氨基酸 267 至 397）。瓦格纳等人（1999）得出结论，大多数（如果不是全部）弱 D 表型携带改变的 RhD 蛋白，表明存在因果关系。他们认为，弱 D 的基因分型可能会指导恒河猴阴性输血策略，用于易于产生抗 D 的分子弱 D 类型。