跨膜蛋白 CONSORTIN

许多跨膜蛋白靶向细胞表面被认为依赖于货物受体对它们的识别,货物受体与高尔基复合体远端顺行交通的转换因子机制相互作用。Consortin(CNST) 是一种完整的膜蛋白,可作为连接蛋白的结合伙伴、间隙连接的构建块,并作为跨高尔基网络(TGN) 受体参与连接蛋白靶向质膜​​并从细胞中回收表面(del Castillo 等人,2010 年)。

▼ 克隆与表达

通过使用全长 connexin-26(GJB2; 121011 ) 和 connexin-30(GJB6; 604418 ) 作为诱饵对小鼠内耳 cDNA 文库进行酵母 2-杂交筛选,然后对小鼠 cDNA 文库进行 5 素 RACE,del卡斯蒂略等人(2010)克隆小鼠Cnst,并通过数据库分析,然后对总HeLa细胞mRNA进行RT-PCR,他们克隆了人CNST。小鼠 Cnst 编码一个全长 711 个氨基酸的蛋白质,一个较短的 422 个氨基酸的蛋白质,并包含一个长的 N 端胞质片段、一个 C 端跨膜结构域和一个短的胞外 C 端尾。数据库分析表明,consortin orthologs 仅存在于脊椎动物中。小鼠组织的 RT-PCR 分析检测到在内耳、眼睛、大脑、心脏、肺、肝脏、肾脏、睾丸和肌肉中普遍存在的表达。在 HeLa 细胞中,CNST 位于 TGN、细胞质中的管状转运细胞器和质膜上。

▼ 基因功能

德尔卡斯蒂略等人(2010)表明,结合蛋白直接与 TGN 网格蛋白转换因子 GGA1( 606004 ) 和 GGA2( 606005 ) 相互作用,并且通过表达缺乏酸性簇-二亮氨酸(DXXLL) GGA 相互作用基序的结合蛋白突变体来破坏这种相互作用导致细胞内积累connexin-26 和 connexin-45(GJC1; 608655 )。RNA 干扰介导的 HeLa 细胞中结合蛋白表达的沉默阻断了 connexin-32(GJB1; 304040 )、-43(GJA1; 121014 ) 和 -45 的细胞表面靶向,它们在细胞内积累,而结合蛋白的部分消耗和重新分布pool 减缓了间隙连接斑块的细胞内降解。德尔卡斯蒂略等人(2010 年)考虑将跨膜蛋白靶向质膜​​的 TGN 货物受体结合。

▼ 基因结构

德尔卡斯蒂略等人(2010)确定小鼠 Cnst 基因包含 11 个外显子并编码至少 2 个主要亚型。

▼ 测绘

Hartz(2010)基于 CNST 序列(GenBank AK056563 ) 与基因组序列(GRCh37) 的比对,将 CNST 基因对应到染色体 1q44。