睫状根卷曲蛋白; CROCC
ROOTLETIN
KIAA0445
HGNC 批准的基因符号：CROCC
细胞遗传学定位：1p36.13 基因组坐标（GRCh38）：1:16,914,085-16,972,964（来自 NCBI）
▼ 说明
纤毛细根是纤毛细胞的大细胞骨架成分。在光感受器中，睫状根起源于基体的近端并跨越细胞的长度。CROCC（或 rootletin）是睫状细根的主要结构成分。CROCC 还在非纤毛细胞中的成对中心粒之间形成连接体（Yang 等人总结，2006）。
▼ 克隆与表达
Ishikawa 等人通过对大小分级的人脑 cDNA 文库中的克隆进行测序，（1997） 获得了部分 CROCC 克隆，他们将其命名为 KIAA0445。推导的蛋白质与盘尾丝虫主要抗原具有显着的相似性。PCR 分析显示，所有检查的人体组织中都有不同的 CROCC 表达。
杨等人（2002） 克隆了全长的 Crocc，他们称之为 rootletin。推导的 2,009 个氨基酸蛋白质的计算分子量为 227 kD。预计该蛋白质会折叠成 N 末端球状结构域，然后是延伸的卷曲螺旋杆状结构域。Rootletin 与中心体蛋白 Cnap1（CEP2; 609689） 具有显着的结构相似性。Western blot分析检测到rootletin的表观分子量为220 kD，在小鼠视网膜中表达量最高，其次是大脑、气管和肾脏。免疫组织化学分析在所有主要纤毛上皮细胞中检测到根素，在根根高度发达的组织中表达显着。在视网膜中，根素染色反映了细根，细根从基体延伸到突触末端，并沿其长度锚定内质网。在不发育纤毛的细胞中，根素定位于与中心粒重叠的微小斑点，中心粒染色在后期消失。小鼠视网膜的免疫电子显微镜检测到根素为直径约 10 nm 的原丝，尽管束的形状和尺寸变化很大。
巴赫等人（2005）克隆了全长人rootletin。蛋白质印迹分析在从人 U2OS 细胞分离的纯化中心体中检测到表观分子量为 228 kD 的 rootletin。免疫荧光显微镜显示根素为从 2 个中心粒突出的细纤维。
▼ 基因功能
通过在 COS 细胞中的表达，Yang 等人（2002） 发现小根素足以诱导小根形成。根根素形成平行的同二聚体和伸长的高阶聚合物。结构域分析表明，球状 N 端结构域位于微管组织中心，但对于细丝的形成不是必需的。rootletin 的分离杆结构域仍具有细丝伸长能力。对小鼠视网膜 cDNA 文库进行的酵母 2 杂交分析表明，rootletin 的 N 末端头结构域与驱动蛋白轻链 3（KLC3；601334） 相互作用。
巴赫等人（2005） 发现 U2OS 细胞中人 rootletin 的过度表达导致细丝的形成，这些细丝以低表达水平从中心体发出，但以较高水平填充细胞质。荧光标记的中心体蛋白 NEK2（604043） 或 CNAP1 的共表达导致它们被募集到根素丝中。体外激酶测定表明，NEK2 可能在多个位点磷酸化 rootletin。通过小干扰 RNA 消耗 rootletin 会导致中心体分裂，但它不会改变 CNAP1 与中心粒的关联。相比之下，CNAP1 的缺失会放松 rootletin 与中心体的关联。
孤立地，杨等人（2006） 发现小鼠和人 rootletin 在非纤毛细胞的中心粒之间形成了桥梁。Rootletin 在中心粒的近端结合 CNAP1，并且结合似乎很复杂，可能包括头对头和头对尾相互作用，并涉及 rootletin 上的多个位点。与定位于中心粒近端的 CNAP1 不同，rootletin 免疫反应性在 HEK293 细胞中延伸到 2 个中心粒之间和周围。小鼠根叶素在犬肾细胞中的过度表达会破坏中心体功能，导致多核、微核和形状不规则的细胞核增大。Cnap1 显性失活突变体的表达扰乱了 rootletin 在中心体的分布，并在间期细胞中分离了一对中心粒。rootletin 和 CNAP1 都在有丝分裂开始时从中心粒解离，并在分裂间期重新出现。
Graser 等人使用小型干扰 RNA 筛选（2007） 发现 CNAP1、rootletin、pericentrin（PCNT; 605925）、CEP68（616889） 或 CEP215（CDK5RAP2; 608201） 的耗竭会降低 U2OS、A549 和 RPE1 细胞中的中心体凝聚力并导致中心体分裂。CNAP1 和 rootletin 的耗竭产生了最严重的表型。CEP68 的缺失导致中心粒中 rootletin 的丢失，rootletin 或 CNAP1 的缺失导致中心粒中 CEP68 的丢失。与 rootletin 的过度表达不同，单独的 CEP68 过度表达不会导致中心体丝的形成。然而，rootletin 的过度表达导致内源性 CEP68 募集到细丝上。格拉泽等人（2007） 得出结论，CEP68、CNAP1 和 rootletin 在中心体之间形成动态连接结构，必须在有丝分裂开始时将其拆除以进行中心体分离。
▼ 测绘
通过辐射混合分析，Ishikawa 等人（1997） 将 CROCC 基因对应到染色体 1。
通过基因组序列分析，Yang 等人（2002） 将 CROCC 基因对应到人类染色体 1p36.11 和染色体 4。他们在染色体 X 上发现了一个可能的 CROCC 假基因。
