核结合素 2；NUCB2

NEFA

HGNC 批准的基因符号：NUCB2

细胞遗传学定位：11p15.1 基因组坐标（GRCh38）：11:17,276,739-17,349,980（来自 NCBI）

▼ 说明

Nucleobindin-2 是一种钙结合 EF 手蛋白。

▼ 克隆与表达

Barnikol-Watanabe等人（1994）通过用抗CALLA（120520）单克隆抗体筛选由人急性淋巴细胞白血病细胞系构建的cDNA文库，孤立出部分NUCB2 cDNA克隆。他们组装了一个全长克隆，编码推导的 420 个氨基酸的蛋白质，他们将其称为 NEFA，计算出的分子量为 48 kD。该蛋白含有富含碱性氨基酸的推定 DNA 结合结构域（具有潜在的核靶向信号）、2 个螺旋-环-螺旋基序区域、2 个并发 EF 手基序、EF 手之间的酸性氨基酸区域和亮氨酸拉链图案。该蛋白与人NUCB1（601323）高度同源。等电聚焦证明质膜、细胞质和培养物上清液中存在 NUCB2。NUCB2 是一种高度带电的蛋白质，尽管缺乏 N- 或 O- 糖基化位点，但通过 SDS-PAGE 检测其相对分子质量为 55 kD。

▼ 基因功能

为了确定NUCB2是否通过其EF-hand结构域结合Ca（2+），Kroll et al.（1999）使用了与成熟蛋白类似的重组NUCB2的异源过表达以及EF-hand结构域缺失的突变体在酵母中的异源过表达。表达产物实验表明1 mol NUCB2 结合2 mol Ca(2+) 离子。荧光滴定显示2类Ca（2+）结合位点，Kd值为0.08 microM和0.2 microM。圆二色光谱显示添加钙离子后NUCB2中α-螺旋的数量从30%增加到43%。有限的蛋白水解消化表明存在Ca（2+）依赖性构象变化，并伴随着酶的可及性改变。

Oh-I et al.（2006）证明，分泌蛋白nesfatin，对应于NEFA/nucleobindin-2（NUCB2），在大鼠下丘脑食欲控制核中表达。侧脑室内注射 NUCB2 可减少进食。大鼠脑脊液中含有nesfatin-1，一种源自NUCB2的氨基末端片段，在饥饿条件下其在下丘脑室旁核中的表达降低。脑室内注射nesfatin-1以剂量依赖性方式减少食物摄入，而注射中和nesfatin-1的抗体则刺激食欲。相比之下，脑室内注射由NUCB2加工的其他可能的片段不会促进饱腹感，并且NUCB2转化为nesfatin-1对于诱导进食抑制是必要的。长期脑室内注射nesfatin-1可减轻体重，而长期脑室内注射针对编码NUCB2的基因的反义吗啉寡核苷酸后，大鼠体重增加。Nesfatin-1诱导的厌食症发生在瘦素受体（601007）突变的Zucker大鼠中，而抗nesfatin-1抗体不能阻断瘦素（164160）诱导的厌食症。相比之下，中央注射α-促黑素细胞激素（176830）会升高室旁核中的NUCB2基因表达，并且nesfatin-1带来的饱腹感会被黑皮质素-3/4受体拮抗剂所消除（参见155540）。Oh-I et al.（2006）得出结论，nesfatin-1是一种与下丘脑黑皮质素信号传导相关的饱腹感分子。

▼ 基因结构

Caldwell et al.（2001）通过序列分析确定NUCB2基因至少含有14个外显子，跨度约为50 kb。

▼ 测绘

DeAngelis等（1997）通过外显子捕获和序列分析，在染色体11p15-p14上鉴定出了NUCB2序列。