包含 FERM 域的 Kindlin 3； FERMT3

FERMITIN 家族，成员 3
UNC112相关蛋白2； URP2
KINDLIN 3； KIND3
MIG2B

HGNC 批准的基因符号：FERMT3

细胞遗传学位置：11q13.1 基因组坐标（GRCh38）：11:64,205,920-64,223,891（来自 NCBI）

▼ 说明

FERMT3 基因编码参与整合素激活的蛋白质；它在造血细胞中特异性表达（Moser et al., 2008）。另请参见 FERMT1（607900）（上皮细胞特异性）和 FERMT2（607746）（具有更广泛的表达）。

▼ 克隆与表达

Weinstein 等人使用微阵列分析显示几种肿瘤组织中表达发生改变的基因，然后对脑 cDNA 进行 PCR（2003）克隆了全长 URP2 cDNA，编码与秀丽隐杆线虫蛋白 Unc112 具有显着同源性的蛋白。推导的 663 个氨基酸的蛋白质的计算分子量约为 75.4 kD。他们还克隆了一个包含来自白细胞 cDNA 文库的 12 bp 插入片段的变体。该变体编码一种由 667 个氨基酸组成的蛋白质，计算出的分子量约为 76 kD。在其 C 端一半，URP2 包含 2 个 FERM 结构域，侧翼为血小板-白细胞C 激酶底物同源结构域。 URP2 与 MIG2（607746）具有 55.4% 的同一性，与 URP1（607900）具有 58.7% 的同一性。所有 3 种蛋白均与 talin-1（186745）和 talin-2（607349）具有较弱但显着的同源性。 Northern 印迹分析检测到 2.7 kb URP2 转录本在胸腺、脾脏和白细胞中强表达，在肺和胎盘中表达较弱，在其他组织中很少或没有表达。

通过分析慢性淋巴细胞白血病中表达的膜蛋白，然后进行数据库分析，Boyd 等人（2003）鉴定了 MIG2B cDNA。定量 RT-PCR 显示造血组织特异性 MIG2B 表达，并且 B 细胞恶性肿瘤中 MIG2B 表达增加。通过SDS-PAGE检测，MIG2B的表观分子量为60 kD。

▼ 基因结构

韦恩斯坦等人（2003）确定URP2基因包含15个外显子，跨度约20kb，并且定向于端粒到着丝粒方向。 URP2 剪接变体利用替代的外显子 10 受体位点。

▼ 测绘

通过基因组序列分析，Weinstein 等人（2003）将 URP2 基因定位到染色体 11q12。

▼ 基因功能

Manevich-Mendelson 等人使用免疫印迹分析（2009）表明，患有白细胞粘附缺陷 3（LAD3; 612840）的 KIND3 阴性患者在静息 T 细胞中也缺乏 CDGI（RAPGEF1; 600303）的表达（参见分子遗传学），但在 T 细胞激活后获得了 CDGI 表达。用 CXCL12（600835）对正常和 KIND3 阴性细胞进行由内而外（即趋化因子介导）的激活，导致 CXCR4（162643）表达正常，但 LFA1 的构象激活有缺陷（参见 ITGB2；600065），并且在一系列的接触时间。相比之下，VLA4 的内在粘附性（参见 ITGA4；192975）在 KIND3 阴性细胞中很大程度上是保守的。马内维奇-门德尔森等人（2009）得出结论，在人类淋巴细胞中，KIND3 对 LFA1 的粘附性比对 VLA4 的粘附性更重要。

▼ 分子遗传学

整合素是白细胞和血小板的主要粘附受体，与其配体的结合较差，但在“由内而外”结合后变得活跃。通过其他膜受体发出信号。来自白细胞粘附缺陷 3（LAD3; 612840）个体的造血来源细胞表达 β-1（ITGB1; 135630）、β-2（ITGB2; 600065）和 β-3（ITGB3; 173470）整合素，但内部有缺陷out 信号传导导致 LAD1（116920）样免疫缺陷和格兰茨曼血小板无力症（GT; 273800）样出血问题。斯文森等人（2009）指出 Pasvolsky 等人（2007）报道了 RASGRP2 基因（605577）外显子 16 的假定剪接受体位点处的 C 到 A 变化，这是 2 名土耳其患者出现 LAD3 的原因。斯文森等人（2009）在另外 2 名土耳其 LAD3 患者中发现了这种 RASGRP2 变化，但第三名马耳他 LAD3 患者的 RASGRP2 基因没有任何变化。此外，斯文森等人（2009）表明C到A的改变对RASGRP2 mRNA和蛋白水平影响很小或没有影响，并且野生型RASGRP2的表达不能恢复RASGRP2的功能。相反，斯文森等人（2009）在他们报告的 2 名土耳其患者和马耳他患者中，确定 KINDLIN3 基因突变是导致 LAD3 的原因。土耳其患者的 arg509-to-ter（R509X; 607901.0001）无义突变是纯合的，而马耳他患者的外显子 14（607901.0002）剪接受体位点处的 A 到 G 的转变是纯合的。 RT-PCR 分析表明，这两种突变都会破坏突变上游 KINDLIN3 mRNA 的稳定性。 Western blot分析显示患者体内不表达KINDLIN3蛋白，而其父母表达正常。干涉反射显微镜显示野生型 KINDLIN3 纠正了患者 B 细胞对 ICAM1（147840）的粘附和迁移缺陷。斯文森等人（2009）得出结论，KINDLIN3 的突变会导致 LAD3，而野生型 KINDLIN3 可以通过产生整合素粘附接触和整合素介导的 LAD3 淋巴细胞迁移来克服 LAD3 缺陷。

Kuijpers 等人在来自 7 个无关近亲家庭的 9 名 LAD1V 患者中发现，这些患者最初来自土耳其中部（2009）在染色体 11q13 上鉴定出 3 个与疾病相关的基因变异：RASGRP2 中的剪接位点突变、NRXN2（600566）中的内含子缺失以及 FERMT3 中的 R509X 突变。另外两名患者，一名来自土耳其东南部的近亲家庭，另一名来自阿拉伯近亲家庭，在 FERMT3 中存在新的无义突变，但他们缺乏 RASGRP2 和 NRXN2 的变异。土耳其患者中的新 FERMT3 突变为 arg573 至 ter（R573X；607901.0004），而阿拉伯患者中的新 FERMT3 突变为 ter（W229X；607901.0005）。所有受检患者的白细胞和血小板中均未检测到 FERMT3 蛋白表达，并且所有患者均具有相似的中性粒细胞和血小板缺陷。库伊珀斯等人（2009）得出结论，RASGRP1 沉默突变和 NRXN2 内含子缺失不会引起疾病，但与之前报道的 7 个土耳其 LAD1V 家族中 FERMT3 基因外显子 12 的无义突变存在连锁不平衡。他们指出，11 名 LAD1V 患者临床症状的差异表明 LAD1V 不存在严格的基因型-表型关系。

McDowall 等人在一名患有严重 LAD3 的非洲裔美国女孩中（2010）鉴定了 FERMT3 基因中的 2 个不同的纯合突变：G308R（607901.0007）和 1275delT（607901.0008）。体外研究表明，截短的蛋白不能恢复白细胞粘附或迁移，而G308R突变蛋白仅影响迁移。这些发现表明，除了粘附之外，FERMT3 对迁移至关重要的第二种活性。

Robert 等人的一位 33 个月大的吉普赛近亲父母的第一个儿子患有 LAD3 综合征（2011）鉴定了 FERMT3 基因中的纯合剪接位点突变（607901.0009）。他的父母都是杂合子携带者。该患者和他未受影响的母亲也是 ITGA2B 基因突变的杂合子（607759.0008）。

▼ 动物模型

莫泽等人（2008）发现 Kind3 -/- 小鼠在出生一周内死亡，并伴有明显的骨硬化和胃肠道、皮肤、大脑和膀胱的严重出血，这些出血在发育过程中就已经很明显了。具有 Kind3 -/- 肝脏的嵌合动物也出现了明显的止血缺陷，表明血小板功能障碍。 Kind3 -/- 嵌合体中的血小板计数正常，但血小板无法激活整合素。整合素的激活通常发生在血小板接触受伤血管后，并由 talin 与 β-整合素（参见 ITGB3；173470）细胞质尾部的结合介导。莫泽等人（2008）表明 Kind3 与 β-整合素尾部区域的结合与 talin 结合的区域不同，并触发整合素激活。他们得出的结论是，KIND3 是止血和血栓形成中血小板整合素激活的重要元件。

Moser 等人使用免疫沉淀、免疫荧光显微镜和对 Kind3 -/- 小鼠的中性粒细胞进行白细胞粘附分析（2009）证明小鼠 Kind3 与 Itgb2 结合，对于中性粒细胞在 Itgb2 配体（例如 Icam1（147840）和 C3b（120700））上的结合和扩散至关重要。 Kind3 -/- 中性粒细胞在体外和体内失去了对内皮细胞的牢固粘附和阻滞，而选择素（参见 173610）介导的滚动不受影响。莫泽等人（2009）得出结论，KIND3 对于 ITGB1、ITGB2 和 ITGB3 的激活至关重要，并且小鼠中 Kind3 功能的丧失会导致 LAD3 样表型。

▼ 等位基因变异体（9 个精选示例）：

.0001 白细胞粘附缺陷，III 型
FERMT3、ARG509TER

Kuijpers 等人最初报道了一名患有 III 型白细胞粘附缺陷（LAD3; 612840）的 4 岁土耳其男孩（2007）以及一名患有 LAD3 的无关土耳其女婴，Svensson 等人（2009）鉴定了 FERMT3 基因外显子 12 中核苷酸 1525 处的纯合 C-to-T 转换，导致该蛋白的 FERM F2 子结构域中出现 arg509to-ter（R509X）取代。

Kuijpers 等人最初报道了来自土耳其中部 7 个近亲家庭的 9 名患有 LAD3 的儿童（2007），Kuijpers 等人（2009）鉴定了 FERMT3 基因中 R509X 突变的纯合性。所有父母都是该突变的杂合子。

.0002 白细胞粘附缺陷，III 型
FERMT3、IVS13AS、A-G、-2

McDowall 等人最初报道了一名患有 III 型白细胞粘附缺陷（LAD3; 612840）的马耳他患者（2003），斯文森等人（2009）在 FERMT3 基因外显子 14 的剪接受体位点鉴定了纯合 A 到 G 的转变。麦克道尔等人（2003）报道说，该患者的一个妹妹在出生后数小时内因大出血而死亡。指标患者已成功接受骨髓移植治疗。

.0003 白细胞粘附缺陷，III 型
FERMT3、TRP16TER

Malinin 等人发现，来自阿拉伯联合酋长国的 2 名同胞（一名男孩和一名女孩）的症状与严重的 III 型白细胞粘附缺陷（LAD3；612840）一致（2009）鉴定了 FERMT3 基因外显子 2 中的纯合 G 到 A 转变，导致 trp16 到 ter（W16X）取代。两名同胞从 2 周大时开始出现严重出血和反复感染，随后在大约 5 个月大时出现骨硬化症。蛋白质印迹分析显示患者细胞中存在 56 kD FERMT3 片段，但没有全长 FERMT3。作者认为，患者细胞中的 FERMT3 片段可能是由密码子 181 处的另一个下游转录起始位点产生的。

.0004 白细胞粘附缺陷，III 型
FERMT3、ARG573TER

Kuijpers 等人在一名患有 III 型白细胞粘附缺陷（LAD3; 612840）且近亲父母来自土耳其东南部的 2 岁儿童中进行了研究（2009）鉴定了 FERMT3 基因外显子 14 中核苷酸 1717 处的纯合 C 到 T 转换，导致该蛋白的第二个 FERM 结构域中的 arg573 到 ter（R573X）取代。父母双方都是该突变的杂合子。

.0005 白细胞粘附缺陷，III 型
FERMT3、TRP229TER

Kuijpers 等人在患有 III 型白细胞粘附缺陷（LAD3; 612840）和近亲阿拉伯父母的儿童中（2009）鉴定了 FERMT3 外显子 6 中核苷酸 687 处的纯合 G 至 A 转变，导致 trp229 至 ter（W229X）取代。父母双方都是该突变的杂合子。该患者在接受造血干细胞移植后死亡。

.0006 白细胞粘附缺陷，III 型
FERMT3、ARG513TER

Mory 等人在 3 名患有 III 型白细胞粘附缺陷（LAD3; 612840）的土耳其患者中（2008）在 FERMT3 基因的核苷酸 1632 处鉴定出纯合的 C 到 T 转换，导致 arg513 到 ter（R513X）取代。患者的情况是这样的：父母都是 R513X 突变的杂合携带者，在 68 名土耳其对照者中未检测到这种突变。这些患者还具有 Svensson 等人推测的 RASGRP2（605577）剪接位点突变（2009）和 Kuijpers 等人（2009）被排除为 LAD3 的原因。

.0007 白细胞粘附缺陷，III 型
FERMT3、GLY308ARG

McDowall 等人在一名 11 个月大的患有 III 型白细胞粘附缺陷（LAD3; 612840）的非洲裔美国女孩中进行了研究（2010）在 FERMT3 基因中发现了 2 个纯合突变。一个突变是外显子 8 中的 922G-A 转变，导致连接 FERM 子结构域 2 前半部分和 PH 结构域的环中发生 gly308 到 arg（G308R）的取代。第二个纯合突变是 1 bp 缺失（1275delT；607901.0008）。体外研究表明，当由内而外的信号激动剂刺激粘附时，患者 T 细胞无法牢固地粘附到 ICAM1（147840）和纤连蛋白（FN1; 135600）。该缺陷通过野生型 FERMT3 转染得以修复。患者 T 细胞的 FERMT3 mRNA 水平显着降低，但没有 FERMT3 蛋白。体外功能表达测定表明，转染 G308R 突变蛋白的 B 细胞具有正确的 FERMT3 膜定位，并且能够粘附 ICAM1，但与野生型相比无法正确迁移。这些发现表明，除了粘附之外，FERMT3 对迁移至关重要的第二种活性。患者病情严重，有严重出血倾向、反复感染和骨石症。她通过骨髓移植成功治愈。患者未受影响的母亲的两种突变都是杂合的，并且显示出大约一半水平的 FERMT3 mRNA，这与 1 个等位基因上缺乏功能基因一致。

.0008 白细胞粘附缺陷，III 型
FERMT3，1-BP DEL，1275T

McDowall 等人在一名 11 个月大的患有 III 型白细胞粘附缺陷（LAD3; 612840）的非洲裔美国女孩中进行了研究（2010）在 FERMT3 基因中发现了 2 个纯合突变。一种突变是外显子 11 中的 1 bp 缺失（1275delT），导致 β-6 和 β-7 链之间环中的 PH 结构域过早终止。第二个纯合突变是 G308R 取代（607901.0007）。体外功能表达测定表明，转染1275delT突变蛋白的B细胞没有FERMT3膜定位，并且无法粘附ICAM1。研究结果表明，截短的 PH 结构域不再能够进行膜锚定。患者未受影响的母亲的两种突变都是杂合的，并且显示出大约一半水平的 FERMT3 mRNA，这与 1 个等位基因上缺乏功能基因一致。

.0009 白细胞粘附缺陷，III 型
FERMT3、IVS2AS、A-C、-2

Robert 等人在一位 33 个月大的吉普赛近亲父母的长子中发现了 III 型白细胞粘附缺陷（LAD3；612840）（2011）在 FERMT3 基因的内含子 2 中发现了纯合剪接位点突变。该突变是 A 到 C 的变化，影响了外显子 3 的受体剪接位点（使用 cDNA 序列为 310-2A-C），导致在外显子 3 正常开始后使用了 10 个核苷酸的隐秘剪接位点，移码和提前终止。父母均为杂合子携带者。该突变导致血小板和淋巴细胞中缺乏正常的 FERMT3 蛋白、整合素激活失败以及血小板和白细胞整合素依赖性功能受损。该患者和他未受影响的母亲也是 ITGA2B 基因突变的杂合子（607759.0008）。