酰基辅酶A硫酯酶7;ACOT7
酰基辅酶A硫酯酶,长链,细胞质
酰基辅酶A硫酯酶;ACT
CTE-II
酰基辅酶A硫酯水解酶,长链,2
酰基辅酶A水解酶,长链,脑;BACH
酰基辅酶A水解酶,长链,肝脏;LACH
酰基辅酶 A 硫酯酶 2,前
HGNC 批准的基因符号:ACOT7
细胞遗传学定位:1p36.31 基因组坐标(GRCh38):1:6,264,272-6,393,767(来自 NCBI)
▼ 说明
长链酰基辅酶A硫酯酶(ACOTs;EC 3.1.2.2),如ACOT7,存在于所有生物体中,并将脂肪酰辅酶A裂解成游离脂肪酸和辅酶A。ACOT存在于多个细胞区室中,有膜结合型和可溶性两种形式(Engberg et al., 1997)。
▼ 克隆与表达
Broustas et al.(1996)纯化了一种大鼠脑胞质酰基辅酶A硫酯酶,他们将其称为Act,并使用基于该蛋白质序列的引物分离了大鼠cDNA。预测的 358 个氨基酸蛋白质在 SDS-PAGE 上迁移至 40.9 kD。Northern 印迹分析显示大鼠大脑和睾丸中存在 1.65 kb Act mRNA。肝脏中的 Act 表达似乎是由强过氧化物酶体增殖剂的喂养诱导的。Broustas et al.(1996)注意到与Act同源的人类EST的存在。
Engberg等人(1997)从过氧化物酶体增殖剂处理的大鼠中纯化了长链酰基辅酶A硫酯酶的肝胞质同工型,并将其命名为Cte-II,即“胞质长链酰基辅酶A硫酯酶”。 II用于筛选过氧化物酶体增殖物诱导的大鼠肝脏cDNA表达文库。预测的 338 个氨基酸蛋白在 SDS-PAGE 上以 40 kD 迁移。Engberg et al.(1997)观察到Cte-II和密切相关的Act(Broustas et al., 1996)之间存在许多均匀分布的核苷酸差异和C端区域的显着差异,并表明这两种酶是由不同的基因编码的。Engberg et al.(1997)指出存在与Cte-II同源的人类EST。
Yamada等人(1997)从大鼠脑和肝cDNA文库中分离出编码长链酰基辅酶A水解酶的cDNA,并分别命名为克隆Bach和Lach。由于N端区域的核苷酸序列完全不同,但下游序列实际上相同,Yamada等人(1997)认为Bach和Lach是通过选择性剪接源自同一基因。
Yamada等人(1999)利用大鼠Bach cDNA筛选人脑cDNA文库,克隆了BACH。推导的蛋白质含有338个氨基酸,与大鼠巴赫的一致性达95%。Northern 印迹分析在人脑 RNA 中检测到 1.9 kb BACH 转录本。人脑匀浆的生化分析表明,BACH 是一种胞质酶。SDS-PAGE 在 43 kD 处检测到 BACH,但凝胶过滤在约 100 kD 处检测到 BACH,表明该蛋白质形成多聚体。
Yamada等人(2002)通过人脑总RNA的5-prime RACE和RT-PCR鉴定了6种BACH剪接变异体。称为 BACHa 至 BACHd 的四种变体的不同之处在于它们使用 4 个备用第一外显子(分别为外显子 1a 至 1d)中的 1 个,并编码 329 至 380 个氨基酸的蛋白质。这 4 个蛋白均在其 C 端半部含有水解酶结构域和二分核定位信号(NLS),BACHb 和 BACHc 具有 N 端线粒体定位信号。其余 2 个变体包含外显子 X,这是外显子 7 和 8 之间的选择性剪接外显子,会导致移码并引入过早终止密码子。这些 246 和 283 个氨基酸的 C 端截短蛋白缺乏水解酶结构域和 NLS。在转染的小鼠神经母细胞瘤细胞的线粒体中检测到含有线粒体定位信号的 BACH 蛋白,但仅含有 NLS 的蛋白并未定位到细胞核,尽管分离的 NLS 在与测试蛋白融合时具有功能。对人脑的免疫组织化学分析在大脑皮层的锥体细胞和小脑的浦肯野细胞等神经元的细胞质中检测到了 BACHa。在老鼠的大脑中,小脑、延髓和脊髓的某些大神经元的细胞核和胞质中也检测到了巴查。Yamada et al.(2002)提出BACH的NLS可能被全长蛋白掩盖作为一种调节机制。
▼ 基因功能
Broustas et al.(1996)发现表达大鼠Act cDNA的大肠杆菌其Act特异性活性增加了10至15倍。
Yamada等人(1997)发现表达大鼠Bach或Lach cDNA的大肠杆菌的细菌提取物具有高100倍的酰基辅酶A水解酶活性,证明这两种cDNA都编码长链酰基辅酶A水解酶。
Yamada等人(1999)通过分析纯化的BACH对几种脂肪酰辅酶A的活性,发现BACH表现出相对广泛的特异性,碳链为C8至C18的酰基辅酶A是良好的底物。BACH 活性被巯基封闭剂抑制。重组 BACH 对棕榈酰辅酶 A 也有活性。
Yang等(2004)发现5名内侧颞叶癫痫患者(608096)的海马组织中酰基辅酶A水解酶水平与对照组相比显着降低。
▼ 基因结构
Yamada et al.(2002)确定ACOT7基因含有13个外显子,其中包括4个可变的第一外显子(外显子1a至1d)和外显子X,即外显子7和8之间的可变剪接外显子。该基因全长129 kb。
▼ 测绘
Yamada等(1999)通过辐射杂交分析将ACOT7基因定位到染色体1p36.2。Hunt et al.(2005)指出,人类ACOT7基因定位于染色体1p36.31-p36.11,小鼠Acot7基因定位于染色体4E2。
▼ 命名法
Hunt et al.(2005)指出,酰基辅酶A硫酯酶在文献中被称为酰基辅酶A水解酶,但其催化的反应是硫酯键的断裂。他们使用酰基辅酶A硫酯酶名称和根基因符号ACOT对这些酶进行了修订的命名法。