钴胺素代谢相关 B; MMAB

MMAB 基因
COB（I）阿拉胺腺苷转移酶

HGNC 批准的基因符号：MMAB

细胞遗传学位置：12q24.11 基因组坐标（GRCh38）：12:109,553,715-109,573,504（来自 NCBI）

▼ 说明

MMAB 基因编码 cob（I）alamin 腺苷转移酶（EC 2.5.1.17），该酶催化辅因子腺苷钴胺素（AdoCbl）合成的最后一步。 AdoCbl 是一种含维生素 B12 的甲基丙二酰辅酶 A 变位酶（MUT; 609058）（Jorge-Finnigan 等人总结，2010）。

▼ 克隆与表达

多布森等人（2002）在含有 MCM 的细菌操纵子中鉴定了 MMAB，并使用细菌序列鉴定了 EST 并组装了全长人类 MMAB cDNA。推导的 250 个氨基酸蛋白质的计算分子量为 27.3 kD。 MMAB 与小鼠 Mmu 具有 88% 的序列同一性。 Northern 印迹分析显示 1.1 kb 转录物的表达，在肝脏和骨骼肌中表达最高。

▼ 基因功能

MMAB 与肠沙门氏菌中的 PduO（一种 cob（I）alamin 腺苷转移酶）有 45% 的相似性（Johnson 等，2001）。多布森等人（2002）证明，通过放射性 OH-Cbl 的摄取测量，来自 cblB 互补组的 6 名 MMA 患者的成纤维细胞的腺苷-Cbl 水平高于对照细胞的 13%。 MMAB 保守氨基酸残基的错义突变，以及 cblB 组患者基因的剪接突变，进一步证明 MMAB 基因产物具有钴胺素腺苷转移酶的功能。

福尼等人（2022）证明，腺苷钴胺从 MMAB 中的释放被 ATP 激活，并且在 MMUT 蛋白存在的情况下有利于释放。作者还表明，从 MMAB 释放后，腺苷钴胺素并未在溶液中游离，而是与 MMUT 结合，表明存在直接转移。

▼ 基因结构

多布森等人（2002）确定 MMAB 基因由 9 个延伸超过 18.87 kb 的外显子组成。外显子 9 在 2 个替代的聚腺苷酸化位点处结束，并且内含子-外显子连接在人和小鼠之间是保守的。 MMAB 具有与线粒体定位一致的预测前导序列和信号切割位点。

▼ 测绘

通过连锁分析，Dobson 等人（2002）将 MMAB 基因对应到染色体 12q24。

▼ 分子遗传学

多布森等人（2002）分析了6名互补型cblB甲基丙二酸尿症患者的成纤维细胞系，并鉴定了MMAB基因的6个突变。

Jorge-Finnigan 等人在 4 名 MMA cblB 型患者（包括 2 名同胞）中（2010）鉴定了 MMAB 基因中的 5 个不同突变（607568.0004-607568.0008）。其中两个突变是错义的，并在体外证明与野生型相比稳定性降低，酶活性降低；其他 3 个突变被证明会导致患者细胞中的剪接位点缺陷。

Brasil 等人在 2 名 MMA cblB 型同胞中（2015）鉴定了 MMAB 基因中的复合杂合突变（607568.0009-607568.0010）。这些患者没有症状，是通过新生儿筛查发现的。

福尼等人（2022）在 97 名 cblB 型 MMA 患者中鉴定出 MMAB 基因中的 33 个突变，其中包括 16 个新突变。错义突变是最常见的突变类型，最常见的错义突变是在 57 个等位基因中发现的 R186W（607568.0001）和在 19 个等位基因中发现的 R191W（607568.0006）。 Q234X 是最常见的截短突变，在 14 个等位基因中发现。大多数突变影响蛋白质的 C 端一半，在外显子 7 中存在一个热点。该热点对应于残基 173-195，有助于形成钴胺素和 ATP 的结合位点。对 76 名患者的成纤维细胞进行了功能研究，通过丙酸盐掺入测定测量，发现对钴胺素的反应性与 Q234X 突变相关。 R286W 和 R191W 突变没有表现出明显的钴胺素反应。

▼ 等位基因变异体（10 个精选示例）：

.0001 甲基丙二酸尿，cblB 型
MMAB、ARG186TRP

Dobson 等人在 6 名患有 cblB 型甲基丙二酸尿症（251110）的 MMA 患者中（2002）确定 2 个 MMAB 基因中的 556C-T 转变是纯合的，预计这会导致 arg186 到 trp（R186W）的取代。体外摄取测定确定这些患者成纤维细胞中的腺苷-Cbl 水平高于对照细胞的 4%。另外三名患者是复合杂合子，每人携带 1 个突变等位基因。 120 个对照细胞系中的等位基因频率为 60 个中的 1 个。

.0002 甲基丙二酸尿，cblB 型
MMAB、IVS3、G-A、-1

多布森等人（2002）描述了一名患有 cblB 型甲基丙二酸尿症的白人婴儿（251110），该婴儿是 R186W 突变（607568.0001）的复合杂合子，以及 MMAB 外显子 3 剪接受体位点的转变（IVS3 G-1A）。体外摄取测定确定该患者成纤维细胞中的腺苷-Cbl 水平高于对照细胞的 13%。 194个对照等位基因中未发现剪接突变。

.0003 甲基丙二酸尿，cblB 型
MMAB、5-BP DEL、NT572

多布森等人（2002）描述了一名患有 cblB 型甲基丙二酸尿症的白人婴儿（251110），他是 R186W 突变（607568.0001）以及外显子 2 中 5-bp 缺失的复合杂合子。该突变破坏了 arg- 后的阅读框。 190，导致提前终止密码子。体外摄取测定确定该患者成纤维细胞中的腺苷-Cbl 水平低于对照细胞的 1%。

.0004 甲基丙二酸尿，cblB 型
MMAB，ILE96THR

Jorge-Finnigan 等人在 3 名患有 cblB 型甲基丙二酸尿症（251110）的患者中，包括 2 名同胞（2010）鉴定了 MMAB 基因中的复合杂合突变：所有 3 名患者均携带杂合 c.287T-C 转换（c.287T-C, NM_052845.3），导致 ile96 到 thr（I96T）取代， 1 个等位基因。在另一个等位基因上，这 2 个同胞携带 c.584G-A 转换（607568.0005），影响外显子 7 的最后一个核苷酸。对患者成纤维细胞和小基因构建体的分析表明，c.584G-A 突变导致外显子 7 的跳跃和过早终止（Ser174fs），尽管观察到少量正确剪接的转录本（R195H）。一名同胞在 4 岁时发病，并于 4 岁时死亡，而另一名同胞则在 3 个月大时被诊断出来，并在 5 岁时无症状。第三名患者在另一个等位基因上携带杂合性 c.571C-T 转换，导致 arg191 至 trp（R191W；607568.0006）替换。大肠杆菌体外功能表达研究表明，I96T突变蛋白与野生型相比，半衰期缩短，蛋白表达量减少，酶活性降低（与野生型相比约60-65%），但没有显着差异在动力学参数中。 R191W突变蛋白也高度不稳定，表现出蛋白表达降低，以及酶活性降低（约为野生型的52%）。豪尔赫-芬尼根等人（2010）提出I96T和R191W突变可能导致蛋白质折叠异常。通过流式细胞术，Brasil 等人（2015）发现 Jorge-Finnigan 等人报道的同胞细胞中活性氧（ROS）水平升高（2010），与活着的同胞相比，死亡的同胞的水平更高。患者成纤维细胞还表现出耗氧率降低和线粒体异常，包括明显裂变、线粒体数量减少、线粒体变小、缺乏嵴、基质稀疏和颗粒状内含物。

.0005 甲基丙二酸尿，cblB 型
MMAB、SER174FS

讨论 MMAB 基因中的 c.584G-A 转变（c.584G-A，NM_052845.3），导致剪接位点改变、外显子 7 的跳过和过早终止（Ser174fs），这是在化合物中发现的Jorge-Finnigan 等人的 2 名同胞患有 cblB 型甲基丙二酸尿症（251110）的杂合状态（2010），参见 607568.0004。

.0006 甲基丙二酸尿，cblB 型
MMAB、ARG191TRP

讨论 MMAB 基因中的 c.571C-T 转换（c.571C-T，NM_052845.3），该转换导致 arg191-to-trp（R191W）取代，该取代在患有以下疾病的患者中以复合杂合状态发现： Jorge-Finnigan 等人的 cblB 型甲基丙二酸尿症（251110）（2010），参见 607568.0004。

.0007 甲基丙二酸尿，cblB 型
MMAB、IVS4AS、G-C、-1

在患有 cblB 型甲基丙二酸尿症（251110）的患者（P4）中，Jorge-Finnigan 等人（2010）鉴定了 MMAB 基因中的复合杂合突变：内含子 4 中的 G 到 C 颠换（c.349-1G-C, NM_052845.3），导致剪接位点突变和第一个剪接位点的框内缺失外显子 5（Ile117_Gln118del）的 6 个核苷酸，以及外显子 3 最后一个核苷酸中的 c.290G-A 转换（607568.0008），导致外显子 3（Gly66fs）的跳跃。剪接缺陷在患者成纤维细胞和小基因检测中得到证实。该患者在新生儿期发病，但 12 岁时无症状。

.0008 甲基丙二酸尿，cblB 型
MMAB，290G-A

讨论 MMAB 基因外显子 3 最后一个核苷酸处的 c.290G-A 转变（c.290G-A，NM_052845.3），该转变导致外显子 3（Gly66fs）的跳跃，这种转变在复合杂合子中发现Jorge-Finnigan 等人对 cblB 型甲基丙二酸尿症（251110）患者的状态进行了研究（2010），参见 607568.0007。

.0009 甲基丙二酸尿，cblB 型
MMAB、HIS183LEU

Brasil 等人在 2 名患有 cblB 型甲基丙二酸尿症（251110）的无症状同胞中（2015）鉴定了 MMAB 基因外显子 7 中的复合杂合突变：c.548A-T 颠换（c.548A-T，NM_052845.3），导致 his183 到 leu（H183L）取代，以及 3 -bp 框内重复（c.568_570dup；607568.0010），导致残基 arg190 重复。每个未受影响的亲本均具有其中 1 个突变的杂合子，这些突变在外显子组变异服务器数据库中未发现。大肠杆菌提取物的体外功能表达研究表明，与相比，H183L 突变体的半衰期缩短（约为野生型的 50%），并且 ATP:cob（I）alamin 腺苷转移酶（ATR）活性总体降低了 75 倍。野生型，尽管动力学数据与野生型相似。 arg190dup突变蛋白高度不稳定，在任何条件下都无法检测。流式细胞术显示患者细胞中活性氧（ROXS）水平升高，其中 1 名同胞的水平高于其他同胞。患者成纤维细胞还表现出耗氧率降低和线粒体异常，包括明显裂变、线粒体数量减少、线粒体尺寸减小、嵴缺失、基质稀疏和颗粒状内含物。这些患者是通过新生儿筛查发现的。

.0010 甲基丙二酸尿，cblB 型
MMAB、3-BP DUP、NT568

讨论 MMAB 基因中的 3-bp 框内重复（c.568_570dup, NM_052845.3），导致残基 arg190 重复，该重复在 2 名患有 cblB 型甲基丙二酸尿症的同胞中以复合杂合状态发现（251110），巴西等人（2015），参见 607568.0009。