硫酯酶超家族成员 4; THEM4

C 末端调节蛋白； CTMP

HGNC 批准的基因符号：THEM4

细胞遗传学位置：1q21.3 基因组坐标（GRCh38）：1:151,870,866-151,909,511（来自 NCBI）

▼ 说明

硫酯酶（EC 3.1.2.2） 与 THEM4 一样，可水解多种底物中的硫酯键，包括脂肪酸辅酶 A（CoA） 酯和棕榈酰化蛋白质。 THEM4 对中链和长链酰基辅酶 A 酯具有很强的特异性（Zhuravleva 等人总结，2012）。

▼ 克隆与表达

Maira 等人使用 HeLa 细胞 cDNA 文库的酵母 2 杂交筛选，以激酶结构域和 PKB C 末端调节结构域为诱饵（2001）分离出编码CTMP的cDNA。推导的 240 个氨基酸的 CTMP 蛋白与小鼠蛋白有 79% 的一致性。 RT-PCR 分析检测到 CTMP 表达主要在骨骼肌、睾丸、子宫、大脑和肾脏中，心脏、肝脏和肺中的水平较低。多个转录本的存在表明 CTMP 经历了选择性剪接。蛋白质印迹分析显示不同细胞系中 22 至 26 kD 蛋白质的表达。免疫沉淀、免疫印迹分析和免疫荧光显微镜显示，CTMP 与 PKB 共定位于质膜中。电影显微镜显示 CTMP 定位于移动细胞的前缘。

朱拉夫列娃等人（2012） 指出推导的 240 个氨基酸的全长人类 THEM4 蛋白包含一个 36 个氨基酸的 N 端线粒体定位信号，随后是 HGG 硫酯酶基序和 C 端 4HBT（4-羟基苯甲酰基-CoA 硫酯酶） ） 具有催化 asp161 和 thr177 残基的结构域。数据库分析揭示了低等真核生物（包括酵母）中 THEM4 的直系同源物。天然 THEM4 通过尺寸排阻色谱法主要以同二聚体形式洗脱。一小部分作为同四聚体洗脱。

▼ 生化特征

Zhuravleva 等人使用缺乏 N 端线粒体定位信号的重组成熟蛋白（2012） 以 1.6 埃分辨率确定了人类 THEM4 的晶体结构。单体 THEM4 表现为一个长的中央 α 螺旋，周围环绕着 6 链弯曲的反向平行 β 折叠，这是热狗折叠家族硫酯酶的特征。同源二聚体显示出 2 倍对称轴，将 β 折叠延伸为连续的反向平行 12 链 β 折叠。 THEM4 还显示出大的 N 端无序拉伸和卷曲螺旋区域，其中延伸的 α 螺旋紧密附着在弯曲 β 折叠的凸侧上。每个同型二聚体有 2 个活性位点，位于每个热狗螺旋的末端，两个亚基都有助于催化。除了 asp161 和 thr177 之外，催化残基还包括 HGG 基序。

▼ 基因功能

通过突变和免疫沉淀分析，Maira 等人（2001） 确定 CTMP 与 PKB 的 C 端调控结构域形成复合物，但不与全长 PKB 形成复合物。功能和蛋白质印迹分析表明，CTMP 抑制 PKB 的磷酸化，进而抑制糖原合成酶激酶-3-β（605004） 的磷酸化，这是一种 PKB 介导的磷酸化事件。 CTMP 的反义抑制增加了 PKB 激活其下游效应器的能力。 CTMP 在肿瘤细胞系中的表达揭示了琼脂和体内肿瘤生长的消除或延迟。梅拉等人（2001） 提出 CTMP 通过直接结合 PKB 并防止其磷酸化来负调节 PKB，而 PTEN（601728） 通过减少细胞膜上磷脂酰肌醇三磷酸的量来间接抑制 PKB。

▼ 基因结构

梅拉等人（2001） 确定 CTMP 基因至少包含 8 个外显子，跨度约为 40 kb。

朱拉夫列娃等人（2012） 确定 THEM4 基因包含 6 个外显子，跨度为 36.05 kb。

▼ 测绘

梅拉等人（2001） 指出 CTMP 基因定位于染色体 1q21。

朱拉夫列娃等人（2012） 指出 THEM4 和 THEM5 基因（615653） 在 1 号染色体上以头尾相连的方式排列，相距 19.9 kb。小鼠直向同源物对应到 3 号染色体。