锌指 CCCH 结构域蛋白 7B； ZC3H7B

与 NSP3 1 相关的轮状病毒 X 蛋白； ROXAN1
ROXAN
KIAA1031

HGNC 批准的基因符号：ZC3H7B

细胞遗传学位置：22q13.2 基因组坐标（GRCh38）：22:41,301,525-41,360,147（来自 NCBI）

▼ 说明

ZC3H7B 是一种 RNA 结合蛋白，可能参与转录调节。 ZC3H7B 与轮状病毒非结构蛋白 NSP3 相互作用，并可能在轮状病毒复制中发挥作用（Vitour 等人，2004）。 ZC3H7B 似乎也在 microRNA（miRNA） 的生物发生中发挥作用（Treiber et al., 2017）。

▼ 克隆与表达

Vitour 等人通过对猴肾 CV-1 细胞 cDNA 文库进行酵母 2 杂交筛选，鉴定与轮状病毒非结构蛋白 NSP3 相互作用的蛋白质，然后进行数据库分析（2004） 鉴定出人类 ZC3H7B，他们将其称为 ROXAN1。人 ROXAN1 含有 977 个氨基酸，计算分子量为 110 kD。 ROXAN1 在其 N 端半部具有四肽重复序列（TPR） 和亮氨酸-天冬氨酸（LD） 蛋白质-蛋白质相互作用基序，在其 C 端半部具有 1 个 C2H2 型和 4 个 C3H1 型锌指基序。 ROXAN1 还具有 C 端卷曲螺旋结构域。数据库分析表明 ROXAN1 mRNA 普遍表达。数据库分析确定了 ROXAN1 在哺乳动物、鱼类、两栖动物、鸟类和无脊椎动物脊索动物海鞘中的明确直系同源物。

▼ 测绘

维图尔等人（2004） 指出 ZC3H7B 基因对应到染色体 22。

Gross（2018） 根据 ZC3H7B 序列（GenBank AF188530） 与基因组序列（GRCh38） 的比对，将 ZC3H7B 基因对应到染色体 22q13.2。

▼ 基因功能

Vitour 等人通过酵母 2-杂交分析、转染 COS-7 细胞中的免疫共沉淀分析以及转染 HEK293 细胞中的突变分析（2004）表明ROXAN1的LD基序在轮状病毒感染期间与NSP3的氨基酸163至240相互作用。与 ROXAN1 相互作用所需的 NSP3 区域包括 NSP3 二聚化结构域的一部分，并且靠近 eIF4G（EIF4G1；600495）结合结构域。在转染的 COS-7 细胞中进行的酵母夹心杂交实验和免疫沉淀分析表明，NSP3 二聚体可以同时与 ROXAN1 和 eIF4G 相互作用，在轮状病毒感染的细胞中形成三元复合物。在转染的 HEK293 细胞中，ROXAN1 和 eIF4G 仅在 NSP3 存在的情况下相互作用。维图尔等人（2004） 假设 ROXAN1 可能在转录调节中发挥作用。

Harb 等人通过对 NSP3-ROXAN 复合物进行建模（2008） 鉴定了 NSP3 中的 2 个突变，即 arg187 突变为 glu（R187E） 和 lys191 突变为 glu（K191E），这些突变破坏了 NSP3 与 ROXAN 的相互作用，但不影响 eIF4G 结合。利用这些突变，作者发现 NSP3-ROXAN 相互作用的破坏显着降低了 PABPC1（604679）（一种核质穿梭蛋白）的核定位效率。转染的 HEK293 细胞中的免疫共沉淀分析表明，PABPC1 和 ROXAN 以不同的序列特异性结合 RNA，并通过 RNA 中间体相互作用。 PABPC1 使用 CRM1（XPO1; 602559） 依赖性输出途径退出细胞核，该途径依赖于 CRM1 与核输出信号的相互作用。突变分析表明，ROXAN LD 结构域可以在 PABPC1 输出中充当 NES。免疫荧光分析表明，在未感染的细胞中，ROXAN 和 PABC1 主要分别定位于细胞核和细胞质，而轮状病毒感染的细胞的细胞核中积累了 PABPC1，并且 ROXAN 被耗尽。哈布等人（2008） 得出结论，ROXAN 是参与 PABC1 核细胞质定位的 NSP3 的细胞伴侣。

Treiber 等人使用基于蛋白质组学的下拉方法（2017） 发现人类 ZC3H7B 及其旁系同源物 ZC3H7A（619819） 与 MIR7-1（615239）、MIR16-2 和 MIR29A（610782） 前体的发夹相互作用。进一步分析表明，ZC3H7 蛋白识别发夹顶端环中的 ATA（A/T） 基序。 HEK293 细胞中 ZC3H7B 的敲除降低了成熟 MIR7 的水平。 HEK293 细胞中 ZC3H7A 和 ZC3H7B 的敲除证实了这些蛋白质在调节 MIR7-1 生物发生方面发挥着冗余作用。