G 蛋白偶联受体，C 族，第 6 组，A 成员；GPRC6A
HGNC 批准基因符号：GPRC6A
细胞遗传学定位：6q22.1 基因组坐标（GRCh38）：6:116,792,085-116,829,240（来自 NCBI）
▼ 说明
G 蛋白偶联受体（GPCR）超家族 C 家族的成员，例如 GPRC6A，其特征是具有与膜内 7 次跨膜环区域连接的进化保守的氨基酸感应基序。GPCR C 家族的几个成员，包括 GPRC6A，也具有长的 N 端结构域（Pi 等人总结，2005）。
▼ 克隆与表达
Wellendorph 和 Brauner-Osborne（2004）通过搜索 C 族 GPCR 数据库，然后对人肾 cDNA 文库进行 PCR，克隆了 GPRC6A 的 3 个剪接变体。全长转录本编码isoform-1，包含926个氨基酸，与金鱼气味受体有45%的同源性，与人类钙敏感受体（CASR;）有34%的同源性。601199）。Isoform-1 具有一个 N 末端信号肽，随后是一个长的 N 末端结构域、一个富含半胱氨酸的中央区域以及位于其 C 末端一半的 7 个跨膜区域。它还在细胞外环 1 和 2 中具有 2 个保守的半胱氨酸，可形成二硫键、几个推定的 N-糖基化位点和一个磷酸化位点。选择性剪接产生同种型 2 和 3，分别含有 751 和 855 个氨基酸。这些亚型与亚型 1 的不同之处仅在于 N 端结构域的框内删除。Northern 印迹分析检测到骨骼肌、大脑、白细胞和肾脏中多个 GPRC6A 转录物的弱表达。RT-PCR检测到编码isoform-1的变体在脑、骨骼肌、睾丸和白细胞中表达最高，在肝、心脏、肾和脾中表达较低，在肺、胰腺、胎盘和卵巢中表达较弱。在胸腺、前列腺、小肠和结肠中未检测到表达。除了肾脏外，编码同工型 1 和 2 的转录本的表达相同，编码同工型 2 和 3 的转录本的表达比编码同工型 1 的转录本弱得多。
Pi等人（2005）利用RT-PCR从人肾总RNA中克隆了GPRC6A。RT-PCR 分析检测到所有测试组织（包括骨骼、颅骨和脂肪）以及小鼠成骨细胞系中的表达。共聚焦显微镜显示，表位标记的人 GPRC6A 在转染的 HEK293 细胞的细胞表面表达。
Wellendorph et al.（2007）从外周味觉乳头mRNA中克隆了大鼠Gprc6a。推导的 928 个氨基酸的蛋白质与人类 GPRC6A 有 80% 的同一性。RT-PCR检测到大鼠组织中广泛但微弱的表达，其中在软腭中表达最高。大鼠Gprc6a在转染的人胚胎肾细胞表面表达。去糖基化测定显示 Gprc6a 高度糖基化。
▼ 基因功能
通过评估G蛋白偶联的ERK（参见MAPK3；601795）磷酸化或报告基因活性，Pi et al.（2005）表明，在 HEK293 细胞中表达后，表位标记的 GPRC6A 被细胞外钙激活，但不被细胞内钙激活。GPRC6A 对钙的亲和力比 CASR 弱。与 CASR 类似，GPRC6A 也可以被镁、锶、钆和拟钙剂 NPS R568 激活。然而，与CASR不同，GPRC6A也被铝激活。GPRC6A 的激活与细胞内钙动员相关。使用特异性抑制剂表明 GPRC6A 与 G-α-i 偶联（参见 GNAI1；139310）,G-α-q（GNAQ；600998）、RHOA（165390）。β-arrestin（见ARRB1；107940），它将受体与其同源 G 蛋白解偶联，抑制 GPRC6A 激活。骨钙素（BGLAP；112260），一种骨中丰富的钙结合细胞外基质蛋白，在阈值细胞外钙浓度存在下，增强表达 GPRC6A 的 HEK293 细胞中报告基因的活性。骨钙素还刺激小鼠成骨细胞系中的报告基因活性。相反，骨钙素抑制表达 CASR 的 HEK293 细胞中钙刺激的活性。
Wellendorph et al.（2007）通过与组成型活性混杂G蛋白共表达，发现大鼠和小鼠Gprc6a优先被L-鸟氨酸激活，而人GPRC6A优先被L-精氨酸激活。大鼠Gprc6a被其他脂肪族、中性和碱性氨基酸激活较弱，Mg（2+）是L-鸟氨酸反应的正调节剂。
Wellendorph et al.（2007）报道，转染的人细胞表面不表达人GPRC6A。然而，在细胞表面表达的嵌合人类蛋白被L-精氨酸激活。另见分子遗传学。
▼ 基因结构
Wellendorph and Brauner-Osborne（2004）确定GPRC6A基因包含6个编码外显子，跨度超过34.2 kb。
▼ 测绘
Wellendorph和Brauner-Osborne（2004）通过基因组序列分析，将GPRC6A基因定位到染色体6q22.31。
Pi et al.（2005）指出，小鼠 Gprc6a 对应到染色体 10。
▼ 分子遗传学
Jorgensen等人（2017）通过比较大鼠、小鼠、倭黑猩猩和人类GPRC6A蛋白的序列，鉴定出第三细胞内环（ICL3）中控制细胞表面表达和GPRC6A功能的序列。在人类中，ICL3 的主要序列是 KGKY，这会导致细胞内滞留和功能缺乏。人类序列数据库检索发现人类 GPRC6A 直向同源物具有 ICL3 序列 KGRKLP（rs386705086）。突变分析和交换 ICL3 序列证实，KGRKLP 赋予细胞表面 GPRC6A 表达和对 L-鸟氨酸、L-精氨酸和 L-赖氨酸的反应，与 EGFR Gprc6a 的情况相似。对人类数据集的检查显示，人群（主要是非洲人）携带 ICL3 变体 KGRKLP。只有一小部分欧洲和亚洲人群具有KGRKLP变异，并且其中很大一部分人在GPRC6A基因的外显子1中还携带SNP，该SNP引入了提前终止密码子（rs6907580），导致受体蛋白无功能。非洲人群的情况并非如此，其中很大一部分是 KGRKLP 变体的杂合子或纯合子，没有证据表明 KGRKLP 与提前终止 SNP 之间存在联系。
