转换因子 蛋白 2 相关激酶 1；AAK1

AP2 相关激酶 1
KIAA1048

HGNC 批准的基因符号：AAK1

细胞遗传学定位：2p13.3 基因组坐标（GRCh38）：2:69,457,997-69,643,739（来自 NCBI）

▼ 说明

AAK1 是一种丝氨酸/苏氨酸激酶（STK），通过磷酸化 mu-2 子单元（AP2M1；转换因子蛋白-2（AP2；601024）见601026）。AAK1 对 mu-2 的磷酸化受到网格蛋白的刺激（参见 118955），并促进细胞表面受体掺入网格蛋白包被的凹坑（Henderson 和 Conner 总结，2007）。

▼ 克隆与表达

Kikuno 等人（1999）通过对从大小分级的成人大脑 cDNA 文库中获得的克隆进行测序，克隆了 AAK1，并将其命名为 KIAA1048。转录本的 3 引物末端有几个重复元件，推导的 863 个氨基酸的蛋白质具有蛋白激酶结构域。RT-PCR ELISA 检测到所有成人和胎儿组织以及所有特定成人大脑区域中 AAK1 的表达水平相当。

Conner and Schmid（2002）报道，推导的 863 个氨基酸的人 AAK1 蛋白具有 N 端 STK 结构域，随后是富含谷氨酰胺、脯氨酸和丙氨酸（QPA）的区域以及推定的 C 端 AP2 相互作用结构域。免疫印迹分析显示，Aak1 在大鼠脑中的表观分子量约为 145 kD，在大鼠肝脏中的表观分子量约为 100 kD，表明 Aak1 基因存在组织特异性剪接。在大鼠海马神经元中，Aak1 与内吞机制的组件共定位，包括网格蛋白、AP2 和 dynamin-1（DNM1；602377），在突触前末端富集。HeLa 细胞中 AAK1 的免疫定位揭示了与 AP2 共定位的整个细胞的点状模式。在迁移细胞中，AAK1 在前沿高度富集，与 AP2 和网格蛋白共定位。

Henderson和Conner（2007）通过人脑cDNA文库的3-prime RACE，克隆了AAK1的剪接变体，由于其延伸的3-prime区域，他们将其称为AAK1-long（AAK1L）。推导的 960 个氨基酸的 AAK1L 蛋白的计算分子量为 104 kD。AAK1L 具有 863 个氨基酸的短亚型（AAK1S）的 STK 结构域、QPA 丰富结构域和网格蛋白结合结构域（CBD），并具有额外的 C 端 CBD（CBD2），其中含有 5 个预测的低亲和力网格蛋白-结合主题。Northern 印迹分析检测到一个 5 kb 转录物，该转录物在大脑中高表达，在肝脏中表达较弱。9-kb 转录本以及 5-kb 转录本在心脏中表达。在其他检查的组织中几乎没有检测到 AAK1 表达。

▼ 基因功能

Conner 和 Schmid（2002）利用蛋白质下拉分析发现，大鼠 Aak1 与来自大鼠脑、牛脑和大鼠肝裂解物的 Ap2 相互作用。人 AAK1 在体外表现出自磷酸化活性。纯化的牛脑转换因子蛋白或网格蛋白包被的囊泡导致 mu-1（AP1M1；603535）和mu-2。AAK1 介导的 AP2 磷酸化抑制网格蛋白介导的荧光标记转铁蛋白（TF; 190000）。

Henderson 和 Conner（2007）利用体外蛋白质结合测定发现全长人 AAK1L 及其分离的 C 端 CBD2 与网格蛋白结合。与AAK1S一样，AAK1L也结合AP2。AAK1L 和 AAK1S 在体外表现出相似的 mu-1 和 mu-2 基础磷酸化和网格蛋白刺激磷酸化。HeLa 细胞中全长 AAK1L 或其分离的 CBD2 的过度表达会破坏 AP2 募集到网格蛋白包被的凹坑，与 AAK1S 类似。然而，CBD2更有效地抑制转铁蛋白内吞作用和转铁蛋白受体（TFRC；190010）通过早期/分选内体进行回收。通过小干扰 RNA 消耗 AAK1 也会损害 TFRC 循环，导致转铁蛋白在核周区室和细胞皮质附近的管状内体中积累。重组 AAK1L 的表达可挽救内源 AAK1 耗尽的细胞中的 TFRC 循环。Henderson and Conner（2007）得出结论，AAK1在内体途径的多个步骤中发挥作用。

▼ 测绘

Kikuno et al.（1999）通过辐射杂交分析将AAK1基因定位到染色体2。

Hartz（2015）根据AAK1序列（GenBank AB028971）与基因组序列（GRCh38）的比对，将AAK1基因定位到染色体2p13.3。