E2F 转录因子 8; E2F8

HGNC 批准基因符号：E2F8

细胞遗传学定位：11p15.1 基因组坐标（GRCh38）：11:19,224,063-19,241,655（来自 NCBI）

▼ 说明

E2F转录因子，例如E2F8，对于协调细胞周期进展和增殖所需基因的表达至关重要（Christensen et al., 2005）。

▼ 克隆与表达

Christensen等人（2005）通过在数据库中搜索与E2F7（612046）相似的基因，然后对HeLa细胞cDNA文库进行PCR，克隆了E2F8。推导的 867 个氨基酸蛋白质的计算分子量为 94.3 kD。E2F8 包含 2 个 N 端 DNA 结合域，与小鼠 E2f8 和人 E2F7 分别具有 82.2% 和 31.9% 的氨基酸同一性。实时定量PCR检测到癌和肉瘤来源的转化细胞系中丰富的E2F8表达。转染的 HeLa 细胞的蛋白质印迹分析揭示了约 100 kD 的主要 E2F8 蛋白。转染的 U2OS 人骨肉瘤细胞的免疫荧光显微镜将 E2F8 定位于核区室。

Maiti et al.（2005）克隆了小鼠E2f8，它编码一个推导的860个氨基酸的蛋白质，含有2个E2F样DNA结合域和3个假定的核定位信号。Northern印迹分析检测到E2f8在小鼠肝脏、皮肤、胸腺和睾丸中高表达，但在脑、肌肉和胃中不表达。

▼ 基因功能

Christensen et al.（2005）发现U2OS细胞中E2F1（189971）的激活导致E2F8 mRNA上调10倍，且与蛋白质从头合成无关。染色质免疫沉淀（ChIP）分析显示，在U2OS细胞中，E2F1以及E2F4（600659）和E2F7在较小程度上占据了E2F8启动子。与 E2F1 不同，E2F4 和 E2F7 是转录抑制因子。在人成纤维细胞中，E2F3（600427）也占据了E2F8启动子。E2F8 的表达在细胞周期 G1-S 期转变的同步 HeLa 和 U2OS 细胞中上调。E2F8 结合共有 E2F 位点并抑制报告质粒的转录。E2F8在人成纤维细胞中的异位表达抑制细胞增殖。

Maiti et al.（2005）表明，老鼠E2f1的过度表达导致老鼠E2f8启动子驱动的报告基因的剂量依赖性激活。表位标记的 E2f8 与 E2F 探针特异性结合，突变分析表明，参与 E2f8 二聚化的两个 DNA 结合域内的残基是 DNA 结合所必需的。RT-PCR显示小鼠胚胎成纤维细胞S期E2f8表达轻度诱导，且E2f8在小鼠胚胎成纤维细胞中的过度表达阻碍增殖。

▼ 基因结构

Christensen et al.（2005）确定E2F8基因包含13个外显子，假定的起始密码子位于外显子2。

▼ 测绘

Christensen等（2005）通过基因组序列分析，将E2F8基因定位到染色体11p15.1。他们将小鼠 E2f8 基因定位到染色体 7。

▼ 动物模型

Li等（2008）发现E2f7 -/- 小鼠和E2f8 -/- 小鼠均发育正常并能活到老年。杂交产生的 E2f7 +/- E2f8 -/- 小鼠发育正常，但大多数 E2f7 -/- E2f8 +/- 动物身材矮小，并在出生后的前 3 个月内死亡。双敲除胚胎在胚胎第11.5天时因大量细胞凋亡和血管扩张而死亡，并显示E2f1和p53（TP53；191170），以及许多与压力相关的基因。ChIP 分析显示靶启动子（包括 E2f1 和 Cdc6）上存在 E2f7 和 E2f8 的同二聚体和异二聚体。E2f1 或 p53 的缺失抑制了双敲除胚胎中的大量细胞凋亡。