受体相互作用丝氨酸-苏氨酸激酶 4；RIPK4

锚蛋白重复结构域蛋白 3；ANKRD3
PKC-δ-相互作用蛋白激酶; DIK
RIP4

HGNC 批准的基因符号：RIPK4

细胞遗传学定位：21q22.3 基因组坐标（GRCh38）：21:41,739,373-41,767,052（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

鉴定与蛋白激酶C-δ（PRKCD）相互作用的蛋白质 176977），Bahr et al.（2000）利用酵母2-hybrid系统，以大鼠PRKCD催化结构域为诱饵，筛选人角质形成细胞系cDNA文库。他们分离出一种cDNA，将其称为DIK（PKC-δ-相互作用蛋白激酶），编码推导的784个氨基酸的蛋白质，计算分子量为86 kD。该蛋白的 N 端区域包含 12 个在所有蛋白激酶中高度保守的亚结构域、10 个锚蛋白样重复序列和一个潜在的核定位信号。DIK与DAP（600954）有49%的序列相似性；然而，与 DAP 不同的是，它既不包含死亡结构域，也不包含钙调蛋白结合结构域。Bahr等人（2000）在体外转录/转录系统中合成了DIK，并在细菌、HEK、COS-7和杆状病毒感染的昆虫细胞中将DIK表达为重组蛋白。在体外系统和细胞中，但不是在细菌中，产生了各种后修饰形式的 DIK。

Chen等人（2001）以PKCB1（176970）的催化结构域为诱饵，利用酵母胎儿文库的酵母2-杂交筛选克隆了小鼠同源物。Northern印迹分析显示除脾脏之外的所有检查组织中都有丰富的表达。交配后10.5至14.5天小鼠胚胎的原位杂交表明表达受到发育调节。通过Western blot分析，Chen et al.（2001）鉴定了Ankrd3（一种110 kD的胞质蛋白）的3种形式，以及100 kD和112 kD与膜相关的2种形式。他们确定 110-kD 和 112-kD 形式被磷酸化，并且磷酸化需要活性催化结构域。Ankrd3 在转染的 COS 和 293T 细胞中的免疫定位显示出精细的网状染色模式，与 Ankrd3 与细胞内膜的关联一致。

Gollasch et al.（2015）利用cDNA-PCR分析证明了RIPK4在毛囊和表皮组织中的表达。

▼ 基因结构

Bahr等（2000）确定DIK基因含有8个外显子，跨度约为27.7 kb。

▼ 测绘

Hattori等（2000）通过序列分析，将人类ANKRD3基因定位到染色体21q22.3。

▼ 基因功能

Bahr等（2000）发现DIK表现出自身磷酸化和底物磷酸化。免疫沉淀实验表明，DIK 与 PRKCD 催化结构域的相互作用比与全酶的相互作用更好。

Mitchell et al.（2012）利用人原代角质形成细胞，在 RIPK4 转录起始位点 56 kb 范围内鉴定出 4 个高保真 p63（603273）结合位点，瞬时转染实验表明，通过4 个 p63 结合位点。Mitchell 等人（2012）得出结论，RIPK4 是 p63 的直接转录靶标，p63 是一种已知的分层上皮发育调节因子，在预防翼状胬肉综合征的分子事件级联中充当节点（参见 263650）。

Huang et al.（2013）发现异位RIPK4，但不是催化失活或Bartsocas-Papas综合征（BPS1；263650）RIPK4突变体，诱导胞质β-catenin（116806）的积累以及与WNT3A（606359）类似的转录程序。在爪蟾胚胎中，Ripk4 与共表达的爪蟾 Wnt8 协同作用，而 Ripk4 吗啉代或催化失活的 Ripk4 拮抗 Wnt 信号传导。RIPK4 与转换因子蛋白 DVL2（602151）组成型相互作用，并在 WNT3A 刺激后与辅助受体 LRP6（603507）相互作用。RIPK4 磷酸化 DVL2 有利于经典 Wnt 信号传导。RIPK4 敲低可抑制异种移植人类肿瘤细胞的 WNT 依赖性生长，表明 RIPK4 过度表达可能有助于某些肿瘤类型的生长。

Oberbeck et al.（2019）表明RIPK4在小鼠发育中的作用需要其激酶活性；表皮表达的RIPK4和IRF6（607199）调节相同的生物学过程；IRF6 在 ser413 和 ser424 处的磷酸化启动了 IRF6 的激活。Oberbeck 等人使用 RNA 测序（RNA-seq）、组蛋白染色质免疫沉淀测序（ChIP-seq）以及使用测序（ATAC-seq）对野生型和 IRF6 缺陷小鼠胚胎中的皮肤进行转座酶可及染色质分析.（2019）定义了表皮分化过程中IRF6调控的转录程序。IRF6 在二价启动子处富集，IRF6 缺陷导致参与脂质代谢和紧密连接形成的基因表达缺陷。因此，Irf6缺失皮肤的角质层脂质组成异常，最终导致表皮屏障功能严重缺陷。Oberbeck 等人（2019）得出的结论是，他们的结果解释了 RIPK4 和 IRF6 如何发挥作用以确保表皮的完整性，并为为什么当该轴出错时会导致以口面部、皮肤和生殖器异常为特征的发育综合征提供了机制见解。

▼ 分子遗传学

巴索卡斯-帕帕斯综合症 1

2名来自无关近亲家庭的男孩患有Bartsocas-Papas 1型腘胬肉综合征（BPS1；263650），Mitchell et al.（2012）鉴定出无意义的纯合性（S376X；605706.0001）和一个错义（I81N; 605706.0002）RIPK4基因突变。作者指出，Ripk4 缺失小鼠表现出严重的表皮粘连，表现出 Bartsocas-Papas 综合征的表型。

Kalay et al.（2012）在土耳其一个大近亲家庭的2个患致命腘胬肉综合征的表兄弟姐妹中，定位到染色体21q22.3，分析了候选RIPK4基因，并鉴定了错义突变的纯合性（I121N；605706.0003）；两组父母的突变都是杂合的。Kalay et al.（2012）还在一个埃及近亲家庭中对一个3.5个月大时死亡的受影响女孩的RIPK4基因进行了测序，发现死亡婴儿的RIPK4（605706.0004）中的1-bp插入是纯合的。她未受影响的父母是杂合子。

Busa 等人（2017）在摩洛哥近亲结婚的患有 Bartsocas-Papas 综合征 1 的男性胎儿（患者 1）中鉴定出 RIPK4 基因（605706.0007）中单碱基重复的纯合性。父母的突变是杂合的。

昌德综合征

一名 5 岁女孩，被推定诊断为踝睑-外胚层缺陷-唇腭裂综合征（AEC；Gripp等人（2013）在TP63基因（603273）没有突变的情况下，筛选了RIPK4基因的突变，并鉴定出纯合性错义突变（G163D；106260）。605706.0005）。孩子的父母是突变杂合子。作者认为该疾病是 Bartsocas-Papas 综合征的一种减弱形式，但指出与之前报道的 BPS 患者不同，他们的患者没有翼状胬肉或并指（参见 CHAND 综合征，214350）。作者还指出，TP63 是 RIPK4 的直接转录激活剂。

Gollasch等人（2015）在科威特近亲亲属的3名诊断为AEC或CHAND综合征的儿童中排除了TP63基因的突变，并鉴定了RIPK4基因（E284K；E284K；605706.0006）因家庭失调而隔离。分子模型表明，该突变可能导致蛋白质同二聚体结构的稳定性降低。

在一名 3 岁男孩（患者 2）中，突尼斯血统的近亲父母所生，患有 CHAND 综合征，Busa 等人（2017）在 RIPK4 基因中发现了与报告的患者中发现的相同 E284K 突变的纯合性Gollasch 等人（2015）。

▼ 动物模型

Rountree et al.（2010）研究了Rip4 -/- 小鼠，这些小鼠出生时因表皮分化缺陷而死亡，导致皮肤褶皱比野生型同窝小鼠少，后肢和尾部与身体部分融合，以及外孔融合、口腔和食道。Rip4 的转基因表皮特异性表达挽救了 Rip4 -/- 小鼠的表皮表型，表明 Rip4 在表皮中自主发挥作用以调节分化。尽管Rip4 -/- 小鼠与Ikk-α（600664） -/- 小鼠和stratifin（SFN；601290）重复脱毛（Sfn Er/Er）小鼠中，K14（148066）-Rip4转基因在这些突变背景下未能促进表皮分化。用 TPA 局部治疗 K14-Rip4 小鼠会引起严重的中性粒细胞炎症，这种效应与 TNFR1（191190）功能无关，但转基因小鼠在 DMBA 引发的 TPA 促进的皮肤癌中肿瘤形成频率没有改变。Rountree et al.（2010）提出，RIP4在表皮中通过PKC（见176960）特异性信号通路发挥作用，调节分化和炎症。

▼ 等位基因变异体（7个精选示例）：

.0001 巴特索卡斯-帕帕斯综合症 1

RIPK4、SER376TER

一名 6 岁男孩，其特征与经常致命的 Bartsocas-Papas 1 型腘胬肉综合征（BPS1；263650），Mitchell 等人（2012）鉴定了 RIPK4 基因外显子 7 中 1127C-A 颠换的纯合性，导致 ser376-to-ter（S376X）取代，预计会导致过早终止密码子和随后的无义介导突变体转录物的降解。患者的近亲父母为突变杂合子。

.0002 巴特索卡斯-帕帕斯综合症 1

RIPK4、ILE81ASN

使用来自一名 3 岁男孩的 DNA 样本，该男孩患有常常致命的 Bartsocas-Papas 1 型腘胬肉综合征（BPS1；263650），之前由 Shanske 等人（2004）研究，Mitchell 等人（2012）鉴定了 RIPK4 基因外显子 2 中 242T-A 颠换的纯合性，导致 ile81-to-asn（I81N）激酶结构域中高度保守残基的取代。尽管没有来自他父母的 DNA，但在 dbSNP、1000 个基因组计划数据库或国家心脏、肺和血液研究所外显子组测序计划的 4,000 多个染色体中都没有发现该突变。

.0003 巴特索卡斯-帕帕斯综合症 1

RIPK4、ILE121ASN

土耳其一个大近亲家庭的 2 名幸存表兄弟患有常常致命的 Bartsocas-Papas 1 型腘胬肉综合征（BPS1；263650），最初由 Aslan 等人（2000）报道，Kalay 等人（2012）鉴定出 RIPK4 基因外显子 2 中 362T-A 颠换的纯合性，导致 ile121-to-asn（I121N）取代丝氨酸/苏氨酸激酶结构域中高度保守的残基。两组父母都是杂合突变，而在 336 名土耳其对照组中未发现这种突变。荧光素酶报告基因检测表明 I121N 突变体没有催化活性。

.0004 巴特索卡斯-帕帕斯综合症 1

RIPK4，1-BP INS，777A

一名埃及女孩在 3.5 个月大时死于 Bartsocas-Papas 综合征-1（BPS1; 263650），最初由 Abdalla 和 Morsy（2011）报道，Kalay 等人（2012）鉴定了 RIPK4 基因外显子 5 中 1-bp 插入（777insA）的纯合性，预计会引起移码，导致提前终止密码子。近亲父母的突变是杂合的。

.0005 昌德综合症

RIPK4、GLY163ASP

一名 5 岁儿童被诊断患有轻症 Bartsocas-Papas 综合征，但没有致死性、翼状胬肉或并指（CHANDS；214350），Gripp et al.（2013）鉴定了RIPK4基因中c.488G-A转变的纯合性，导致丝氨酸-苏氨酸激酶结构域中的gly163-to-asp（G163D）取代。她的父母是突变杂合子。没有对该变体进行功能研究。

.0006 昌德综合症

RIPK4、GLU284LYS

科威特近亲亲属中的 3 名儿童患有 CHAND 综合征（CHANDS; 214350），Gollasch et al.（2015）鉴定了RIPK4基因外显子6中c.850G-A转换（c.850G-A, ENST00000332512）的纯合性，导致在保守的残基。这种突变发生在丝氨酸-苏氨酸激酶结构域之外，与家族中的疾病分离。分子模型表明，该突变可能导致蛋白质同二聚体结构的稳定性降低。

在一名 3 岁男孩（患者 2）中，突尼斯血统的近亲父母所生，患有 CHAND 综合征，Busa 等人（2017）在 RIPK4 基因中发现了与报告的患者中发现的相同 E284K 突变的纯合性Gollasch 等人（2015）。

.0007 巴特索卡斯-帕帕斯综合症 1

RIPK4，1-BP DUP，1074T

一名男性胎儿（患者 1），由摩洛哥近亲结婚父母所孕，患有致命性 Bartsocas-Papas 综合征-1（BPS1；263650），Busa et al.（2017）鉴定出RIPK4基因中单碱基重复（c.1074dupT，NM_020639.2）的纯合性，导致提前终止密码子（E359X）。父母的突变是杂合的，突变发生在丝氨酸-苏氨酸激酶结构域之外。