尼莫样激酶; NLK

HGNC 批准基因符号：NLK

细胞遗传学定位：17q11.2 基因组坐标（GRCh38）：17:28,042,677-28,206,074（来自 NCBI）

▼ 说明

NLK 通过与多种转录因子（包括 TCF/LEF 蛋白（例如 LEF1；153245）、SOX11（600898）、HMG2L1（HMGXB4；604702）和STAT3（102582）（Yamada et al., 2006）。

▼ 克隆与表达

Brott et al.（1998）从新生儿大脑cDNA文库中克隆了Nlk。推导的 515 个氨基酸的蛋白质包含一个富含谷氨酰胺、丙氨酸、脯氨酸和组氨酸的扩展 N 端结构域，后面是 ATP 结合位点和假定的磷酸化/调节位点。N 末端结构域与转录因子中的重复区域具有相似性。Northern印迹分析检测到在成年小鼠脑中高表达的4.0-kb转录本，在其他组织中表达水平较低，包括肺，其中也表达了1.0和1.5 kb的两个较小的转录本。4.0-kb 转录物也在胚胎发生过程中表达。表达在胚胎第 10.5 天时可检测到，到胚胎第 12.5 天达到最大稳态水平，然后下降。COS-7 细胞中表达的 Nlk 的表观分子质量为 60 kD。亚细胞分级分离和免疫荧光显微镜表明，60% 至 70% 的 Nlk 定位于细胞核，其余定位于细胞质。

Kortenjann et al.（2001）克隆了一个具有替代5-prime末端的突变体Nlk剪接体。

通过在EST数据库中搜索与小鼠Nlk相似的序列，然后通过RT-PCR，Kehrer-Sawatzki等人（2000）克隆了人类NLK。推导的蛋白质与小鼠和河豚Nlk分别具有99.8%和81.7%的同一性。Northern 印迹分析检测到 NLK 在多种成人组织中表达，其中在大脑和睾丸中表达水平最高。主要转录本约为5.5 kb，还检测到2个约3.5和2.5 kb的弱表达转录本，后者仅在睾丸中。

Harada等人（2002）通过肺RNA和5-prime RACE的RT-PCR克隆了NLK。推导的 515 个氨基酸蛋白在氨基酸 127 和 415 之间具有激酶结构域。RT-PCR 在所有检查的正常组织和肿瘤样本中检测到 NLK。

▼ 基因功能

Brott et al.（1998）发现小鼠Nlk发生自磷酸化。ATP 结合赖氨酸的突变消除了其自磷酸化的能力，激酶结构域 VIII 中假定的活化苏氨酸的突变也是如此。

Yasuda et al.（2003）发现，在人结肠癌细胞系中，NLK（而非激酶阴性突变体）的过度表达抑制了细胞生长。流式细胞术表明NLK表达增加了凋亡细胞的数量，但没有诱导明显的细胞周期停滞。

TCF/LEF蛋白与β-catenin（CTNNB1；116806）在胚胎发生和肿瘤形成过程中的Wnt（参见164820）信号通路中。Yamada et al.（2006）先前报道NLK通过TCF/LEF蛋白的磷酸化负向调节Wnt信号传导。通过酵母2-杂交和免疫共沉淀分析，他们发现非洲爪蟾和人类NARF（RNF138; 616319）与NLK的C端区域相互作用。NARF还与E2泛素结合酶E2-25K（UBE2K；602846），并在泛素（191339）和E1泛素激活酶（UBA1；UBA1；314370）。NARF还泛素化TCF4（TCF7L2；602228）和LEF1，但不是NLK，呈剂量依赖性。包含野生型 NLK（而非激酶死亡的 NLK）增强了 NARF 与 TCF4 或 LEF1 之间的相互作用。NLK 促进了 TCF4 和 LEF1 的 NARF 依赖性泛素化，并增强了蛋白酶体介导的 TCF4 和 LEF1 降解。报告基因测定证实 NARF 抑制 Wnt 反应元件的 TCF/LEF 依赖性激活。非洲爪蟾胚胎中 Narf 的表达抑制了 Ctnnb1 依赖性第二轴的形成，HeLa 细胞中 NARF 的敲低增强了 WNT3A（606359）依赖性基因的表达。Yamada et al.（2006）得出结论，NARF 是 Wnt 信号传导的 NLK 相关负调节因子，泛素化磷酸化的 TCF/LEF 蛋白，从而靶向它们进行降解。

▼ 基因结构

Harada et al.（2002）确定NLK基因包含11个外显子，跨度超过45 kb。外显子 1 包含起始密码子，外显子 11 包含终止密码子和聚腺苷酸化信号。

▼ 测绘

Kehrer-Sawatzki et al.（2000）通过体细胞杂交分析和FISH将NLK基因定位到染色体17q11.2。

Kortenjann et al.（2001）将小鼠 Nlk 基因对应到染色体 11。他们在染色体 2 上发现了人类基因组中不存在的小鼠 Nlk 假基因。