DEAH框解旋酶16； DHX16

DEAH框多肽 16
死亡/H框 16； DDX16
DEAH框蛋白 2； DBP2
PRP8，S. POMBE，同源物
不可能的任务，斑马鱼，同源；MIS
KIAA0577

HGNC 批准的基因符号：DHX16

细胞遗传学位置：6p21.33 基因组坐标（GRCh38）：6:30,653,127-30,673,006（来自 NCBI）

▼ 说明

核前 mRNA 剪接需要由剪接体进行 2 次酯交换反应，剪接体是由 5 个小核 RNA（snRNA）和近 100 个蛋白质组成的大分子复合物。 DHX16 是一种含有解旋酶结构域的蛋白质，是预催化剪接体形成后前 mRNA 剪接所需的（Gencheva 等，2010）。

▼ 克隆与表达

粟酒裂殖酵母 prp8/cdc28 DEAH 框蛋白参与细胞周期进程，并且与充当剪接因子的几种酿酒酵母 DEAH 框蛋白具有序列相似性。 Imamura 等人使用基于 DEAH 框蛋白保守区域的简并引物进行 RT-PCR（1998）分离出编码与cdc28/prp8同源的蛋白质的人胰腺cDNA。他们将预测的 1,041 个氨基酸的蛋白质命名为 DBP2，包含 RNA 解旋酶中保守的 7 个连续基序。今村等人（1998）发现 GFP-DBP2 嵌合蛋白仅定位于 HeLa 细胞的细胞核。 Northern 印迹分析显示 DBP2 作为 3.4 kb mRNA 广泛表达。在一些组织中观察到了额外的较大条带。

Nagase 等人孤立地（1998）分离出了 DBP2 cDNA，他们将其称为 KIAA0577，作为编码大于 50 kD 的蛋白质的人脑 cDNA 筛选的一部分。

Gencheva 等人通过 HEK293 和 HeLa 细胞的蛋白质印迹分析（2010）发现人类 DHX16 的表观分子质量为 120 kD。 HeLa 细胞裂解物的分级显示出核 DHX16 表达。免疫组织化学分析表明 DHX16 在整个核质和核斑点中表达。

▼ 测绘

通过对辐射混合面板的分析，Nagase 等人（1998）将 DBP2 基因定位到染色体 6。通过荧光原位杂交，Imamura 等人（1998）将 DHX16 基因定位到 6p21.3。

▼ 基因功能

今村等人（1998）发现，当在粟酒裂殖酵母中表达时，DBP2 部分补充了 prp8 突变的表型，表明 DBP2 是 cdc28/prp8 的功能同源物。

根切瓦等人（2010）发现，在 HeLa 细胞核提取物中，针对 DHX16 的抗体抑制前 mRNA 剪接，但不影响前剪接体复合物的形成。 DHX16 在剪接反应过程中与前体 mRNA、剪接中间体和 snRNA 相关，表明它在前体 mRNA 剪接的后期阶段发挥作用。具有保守解旋酶结构域残基突变的 DHX16 的表达，特别是 gly724 突变为 asn（G724N），导致未剪接的测试小基因转录物和含有内含子的前 mRNA 的积累。根切瓦等人（2010）得出结论，DHX16 在第一次酯交换反应之前有助于前 mRNA 剪接。

Gencheva 等人通过对转染的 HEK293 细胞进行微阵列分析（2010）表明具有失活G724N突变的DHX16导致大量未剪接的聚腺苷酸化前体mRNA的积累。 RT-PCR 证实了几个高度受影响的基因的内含子保留在前体 mRNA 中。大多数表现出内含子保留的前体 mRNA 都是高度且普遍表达的。表达突变 DHX16 的细胞中未剪接的转录本保留在细胞核中，并且不受细胞质无义介导的衰变的影响。常见和罕见的未剪接前 mRNA 的内含子保留与其相应的合成小基因的比较表明，内含子的差异积累可能是由它们的转录和/或降解速率而不是由它们的内含子序列决定的。根切瓦等人（2010）的结论是 DHX16 可能是一个通用的剪接因子。

▼ 分子遗传学

通过三重外显子组测序，Paine 等人（2019）在 4 名不相关的神经肌肉眼听觉综合征（NMOAS; 618733）患者中发现了 DHX16 基因（603405.0001-603405.0004）的杂合从头突变。桑格测序证实了两个家族的突变。

▼ 动物模型

Putiri 和 Pelegri（2011）将斑马鱼 Dhx16 确定为母体效应基因“不可能的任务”（mis），在原肠胚形成过程中发挥作用，并且需要激活一些内胚层靶基因。在内胚层诱导途径中，斑马鱼 Dhx16 并不是激活早期合子基因所必需的，但它对于实现后期的节点活性至关重要。合子 Dhx16 表达是胚胎活力所必需的。

▼ 等位基因变异体（4 个选定示例）：

.0001 神经肌肉眼听觉综合症
DHX16、PHE582ILE

通过三重外显子组测序，Paine 等人（2019）在一名女婴（个体 6 ）患有神经肌肉眼听觉综合征（NMOAS；618733）。桑格测序证实该变异是从头发生的。在 ExAC、ARIC 或 gnomAD 数据库中未发现该变体。没有功能研究的报道。

.0002 神经肌肉眼听觉综合征
DHX16、GLN697HIS

通过三重外显子组测序，Paine 等人（2019）在一名女婴（个体 7 ）患有神经肌肉眼听觉综合征（NMOAS；618733）。桑格测序证实该变异是从头发生的。在患有神经肌肉性眼听觉综合征（NMOAS；618733）gnomAD 数据库的男孩的 ExAC、ARIC 或 DHX16 基因中未发现该变异。没有功能研究的报道。

.0003 神经肌肉眼听觉综合症
DHX16、GLY427GLU

通过三重外显子组测序，Paine 等人（2019）在一名患有神经肌肉性眼听觉障碍的男性婴儿中，鉴定出 DHX16 基因中的从头杂合性 c.1280G-A 转变（c.1280G-A，NM_003587.4），导致 gly427-to-glu（G427E）取代综合征（NMOAS；618733）。没有其他样本可用于桑格测序。在 ExAC、ARIC 或 gnomAD 数据库中未发现该变体。没有进行功能研究。

.0004 神经肌肉眼听觉综合症
DHX16、THR674MET

通过三重外显子组测序，Paine 等人（2019）在患有神经肌肉眼听觉综合征（NMOAS; 618733）的男孩（个体 9）的 DHX16 基因中发现了从头杂合的 c.2021C-T 转变（c.2021C-T，NM_003587.4）。没有其他样本可用于桑格测序。在 ExAC、ARIC 或 gnomAD 数据库中未发现该变体。没有进行功能研究。