脂筏连接蛋白1; RFTN1

RAFTLIN
KIAA0084

HGNC 批准的基因符号：RFTN1

细胞遗传学定位：3p24.3 基因组坐标（GRCh38）：3:16,315,845-16,513,699（来自 NCBI）

▼ 说明

Raftlin是脂筏的关键组成部分，参与网格蛋白介导的TLR3（603029）/TLR4（603030）配体的内吞作用（Saeki et al., 2003；立松等，2016）。

▼ 克隆与表达

Saeki et al.（2003）在Raji B细胞中鉴定出RFTN1，也称为raftlin，并发现raftlin cDNA编码一个由578个氨基酸组成的蛋白质，计算分子量为63 kD。推导的人 raftlin 的一级氨基酸序列与鸡 raftlin 的一级氨基酸序列有 56% 的一致性。Northern 印迹分析发现，raftlin mRNA 在脾脏和胸腺中表达最丰富，且仅在淋巴细胞中表达；对人类细胞的 Western 印迹分析发现，该蛋白在 B 细胞系中表达，但在 T 细胞或上皮样细胞系中不表达。对 HEK293T 细胞中表达的人 raftlin 突变体的检查表明，raftlin 的 gly2 和 cys3 残基分别被肉豆蔻酰化和棕榈酰化，并且 raftlin 的这种脂肪酰化是定位在脂筏中所必需的。免疫染色和免疫共沉淀结果显示，在BCR刺激前后，raftlin与脂筏中的B细胞抗原受体（BCR）共定位，但不直接与BCR相互作用。

▼ 基因功能

Saeki等人（2003）敲除鸡DT40 B细胞中的raftlin基因，观察到细胞增殖减少，通过重新引入该基因恢复细胞增殖，表明正常生长速度需要raftlin。在没有 raftlin 的情况下，脂筏的数量减少，而在 raftlin 过表达的情况下，脂筏的数量增加，这表明 raftlin 对于脂筏的形成或维持是必需的。通过消耗胆固醇来破坏脂筏会导致 raftlin 大大减少，并且类似于 raftlin 基因缺失的其他脂筏成分也减少，证实了之前的观察结果。BCR 介导的酪氨酸磷酸化和钙动员因 DT40 细胞中 raftlin 的缺乏而受损，并因 raftlin 过表达而增强，表明 raftlin 通过形成或维持脂筏对于有效的 BCR 信号传导是必需的。

Watanabe et al.（2011）从Raji细胞裂解液中鉴定出raftlin是一种poly（I:C）结合蛋白，并发现其参与poly（I:C）诱导的内体TLR3激活（603029）。免疫印迹分析表明，raftlin 在 Raji 细胞中大量表达，在 HEK293 和 HeLa 细胞中表达水平较低。对 raftlin 敲除的 HeLa 细胞的分析表明，raftlin 不仅在 Poly（I:C）诱导的 IFN-β（147640）产生中起关键作用，而且对于通过受体介导的内吞作用摄取 Poly（I:C）也至关重要。HeLa 细胞中的共聚焦显微镜显示内源性 raftlin 广泛定位于细胞质。Poly（I:C）与摄取受体结合后，细胞质 raftlin 被募集至质膜并与网格蛋白复合物结合，调节 Poly（I:C）的货物分选和递送。人骨髓树突状细胞（DC）实验表明，raftlin 与聚（I:C）摄取受体一起从质膜移动到 TLR3 阳性早期内体。野生型和 raftlin 缺失的骨髓来源 DC（BMDC）之间，poly（I:C）诱导的 IFN-β 产生没有差异，并且细胞对 poly（I:C）的摄取也没有差异，这增加了以下可能性： raftlin功能由raftlin-2（RFTN2）补偿；618215）在 raftlin-null BMDC 中。

Tatematsu et al.（2016）在 raftlin 敲低 HEK293 细胞中研究了 raftlin 在 TLR4（603030）信号传导中的作用，发现无论存在或不存在，脂多糖（LPS）诱导的 TLR4 介导的 IFN-β 启动子激活都需要 raftlin。膜结合CD14（158120）。在 raftlin 敲低的人原代免疫细胞中，raftlin 对于 LPS 诱导的 IFN-β 产生和调节内体 TLR4 信号传导至关重要。共聚焦显微镜表明，在 LPS 刺激下，TLR4 内化到核内体中也需要 raftlin。响应 LPS 刺激，raftlin 从细胞质移动到质膜，与 TLR4 共定位于细胞表面，并与 TLR4 内化。免疫共沉淀测定证实，raftlin 与网格蛋白/AP2 复合物相互作用（参见 107580），并在招募到质膜后与 AP2 一起参与货物的选择，从而介导 TLR4 的内吞作用。Tatematsu等人（2016）制备了Rftn1敲除小鼠和Rftn1-Rftn2双敲除小鼠，发现raftlin和raftlin-2均以细胞类型特异性方式参与LPS诱导的IFN-β产生。

▼ 基因结构

Saeki et al.（2003）通过基因组序列分析确定RFTN1基因由10个外显子组成，全长约200 kb。

▼ 测绘

Saeki et al.（2003）通过基因组序列分析，将RFTN1基因定位到染色体3p。