大钙素;GCA
HGNC 批准基因符号:GCA
细胞遗传学定位:2q24.2 基因组坐标(GRCh38):2:162,318,763-162,375,396(来自 NCBI)
▼ 克隆与表达
通过用纯化蛋白的抗体进行探测,Boyhan 等人(1992)从早幼细胞系表达文库中克隆了 GCA,他们将其称为 Grancalcin。推导的 217 个氨基酸蛋白质的计算分子量为 24 kD。该序列包含一个 EF-hand 钙结合区、一个潜在的磷酸化位点和 2 个潜在的 N-糖基化位点。GCA 与 sorcin(182520)在 192 个氨基酸上有 58% 的同一性,在钙离子的钙结合域上有约 30% 的同一性(见 114220)。Northern 印迹分析显示,1.65 kb 转录物在骨髓中大量表达,而在中性粒细胞、骨髓性白血病细胞和 2 个 Epstein-Barr 病毒转化的 B 细胞系中表达较弱。通过蛋白质印迹分析,在 B 细胞和 T 细胞中观察到低浓度的 28 kD 蛋白,在中性粒细胞和巨噬细胞中观察到较高水平的蛋白。亚细胞分级显示定位依赖于Ca(2+)和Mg(2+)。在不存在二价阳离子的情况下,大钙蛋白定位于胞质部分;单独使用Mg(2+)时,它与颗粒部分分配;在Mg(2+)和Ca(2+)存在下,它与颗粒和膜部分均缔合。
Teahan等人(1992)从慢性粒细胞白血病患者的白细胞去除术样本中纯化了大钙素。纯化的蛋白质通过 SDS-PAGE 迁移为 28-kD 蛋白质,并在凝胶过滤后形成 55 kD 的同二聚体,不依赖于还原剂。没有发现磷酸化或糖基化的生化证据。钙结合通过加钙制剂和去钙制剂在 SDS/PAGE 上迁移的差异来提示,并通过 Ca(2+) 与天然蛋白槽印迹的结合来证实。
▼ 测绘
国际辐射混合图谱联盟将GCA基因定位到染色体2(stSG15301)。