G蛋白偶联受体65; GPR65

T 细胞死亡相关基因 8；TDAG8

HGNC 批准的基因符号：GPR65

细胞遗传学定位：14q31.3 基因组坐标（GRCh38）：14:88,005,135-88,014,811（来自 NCBI）

▼ 说明

GPR65 是一种质子感应 G 蛋白偶联受体。酸性细胞外液刺激GPR65会导致细胞内cAMP的积累（Wang et al., 2004）。

▼ 克隆与表达

在胸腺内成熟期间，自身反应性未成熟胸腺细胞可能被细胞凋亡消除。T细胞受体（TCR）对胸腺细胞刺激的负选择可能在此过程中发挥重要作用（Surh和Sprent，1994）。Choi等人（1996）鉴定出一个小鼠基因，命名为T细胞死亡相关基因8（Tdag8），它编码一种新型的G蛋白偶联受体。他们发现，在糖皮质激素或抗TCR抗体刺激的T细胞杂交瘤的激活诱导死亡过程中，Tdag8的表达增加。Kyaw等人（1998）通过筛选与小鼠Tdag8具有显着同源性的部分cDNA克隆人lambda DASH II基因组文库，鉴定出编码G蛋白偶联受体TDAG8的基因组克隆。全长序列预测蛋白质由 337 个氨基酸组成，分子量为 39.3 kD。TDAG8 蛋白序列与其 小鼠同源物显示出 90% 的相似性和 81% 的同一性，特别是在 7 个跨膜结构域的区域中。TDAG8 有 3 个潜在的 N 连接糖基化位点。Northern印迹分析显示TDAG8主要在淋巴组织中表达。在外周血白细胞中发现了 4.5 kb 和 1.8 kb 的两个主要转录本，其中 1.8 kb 转录本占主导地位。1.8 kb 转录物在脾脏中表达丰富，在淋巴结、胸腺、肺和小肠中表达较少。仅在阑尾、骨髓和胎儿肝脏中看到边缘表达。

▼ 基因功能

Wang等人（2004）使用转染的CHO细胞表明，人TDAG8响应微酸性细胞外环境而增加了cAMP的基础细胞水平，在pH 6.8时观察到最大反应。不可水解的 GTP 类似物与表达 TDAG8 的膜的结合也在 pH 6.8 时达到最大。his10、his14 或 his243 的突变抑制了转染 COS-7 细胞中 TDAG8 的质子传感响应。中性 pH 值下的质子感应会被 CuCl2、溶血鞘脂 1-β-D-半乳糖基鞘氨醇（精神鞘氨醇）以及较小程度的葡萄糖基鞘氨醇和鞘氨醇磷酰胆碱抑制。用地塞米松处理小鼠胸腺细胞可增加 Tdag8 mRNA 并增强 cAMP 对酸性 pH 的反应。Wang et al.（2004）假设关键组氨酸残基的质子化会激活 TDAG8，并且 CuCl2 和溶血鞘脂可能会将组氨酸稳定在非活性构象中。Wang et al.（2004）也发现TDAG8与Gs蛋白（见139320）的结合似乎比与Gq蛋白（GNAQ；GNAQ；GNAQ）的结合更强烈。600998）。

Ishii et al.（2005）发现人类TDAG8在pH 7.2以下作为质子敏感受体发挥作用。转染的 CHO 细胞的细胞内 cAMP 产量最高出现在测试的最低 pH（pH 5.9）下。将细胞转移至 pH 6.4 导致 TDAG8 内化，同时积累 GTP 结合的 Rhoa（165390）并形成显着的应力纤维。

Ihara et al.（2010）发现，在小鼠和人类细胞系中表达人类TDAG8有利于细胞在酸性肿瘤环境中存活和生长。TDAG8 的表达增强了小鼠注射后的肿瘤发育，并增强了 pH 6.4 培养物中的细胞存活率。对表达 TDAG8 的小鼠肺肿瘤的微阵列分析显示，2000 多个基因的表达发生了改变，包括与细胞周期、DNA 修复以及核苷酸和碳水化合物代谢相关的基因上调。Western blot分析显示，TDAG8通过激活PKA（见188830）和ERK（见176948）信号通路，在酸性条件下改善小鼠细胞的增殖并防止细胞死亡。保守的酸感应 his14 和 his243 的替换会损害 pH 敏感性、培养物生长以及促进小鼠肺中肿瘤发展的能力。

Huang et al.（2015）使用经验和基于结构相结合的方法，确定了 GPR65 的变构激动剂和负变构调节剂。将 310 万个分子与 GPR65 模型对接，预测出 GPR65 调节剂，然后在功能测定中得到证实。该方法针对GPR68（601404）进行了详细描述。

▼ 测绘

通过鱼。Kyaw et al.（1998）将TDAG8基因定位到人类染色体14q31-q32.1。