蛋白质二硫化物异构酶样蛋白质，睾丸表达；PDILT

睾丸的 PDI 样蛋白
蛋白质二硫化物异构酶，A 族，成员 7；PDIA7

HGNC 批准的基因符号：PDILT

细胞遗传学定位：16p12.3 基因组坐标（GRCh38）：16:20,359,175-20,404,737（来自 NCBI）

▼ 说明

PDILT是一种睾丸特异性蛋白质二硫键异构酶（PDI），缺乏经典的氧化还原活性催化半胱氨酸基序，但在内质网（ER）中参与分子间二硫键依赖性相互作用（van Lith et al., 2005）。

▼ 克隆与表达

van Lith et al.（2005）通过数据库分析，鉴定出人类PDILT，其编码与PDI（P4HB）27%相同的蛋白；176790）。PDILT有2个预测的硫氧还蛋白（TXN；187700）结构域，但它们缺少PDI的2个经典氧化还原活性催化半胱氨酸基序（CxxC），而是具有SSKQS和WSKKC基序。PDILT 还具有用于 ER 保留/检索的信号肽和 C 端 KEEL 序列。睾丸组织的 RT-PCR 检测到睾丸中特异的 Pdilt 转录本。共聚焦显微镜显示PDILT定位于转染的HeLa细胞的ER，去糖基化分析证实PDILT是一种糖蛋白。

Li et al.（2018）报道全长584个氨基酸的人PDILT蛋白含有信号肽、N端环、4个硫氧还蛋白样结构域（a、b、b-prime和a-prime）、 b-prime 和 a-prime 结构域之间的 X-linker、C 末端尾部和 ER 修复肽（KEEL）。

▼ 基因结构

Van Lith et al.（2005）确定PDILT基因含有12个外显子。

▼ 测绘

Gross（2019）根据PDILT序列（GenBank BC042607）与基因组序列（GRCh38）的比对，将PDILT基因定位到染色体16p12.3。

▼ 基因功能

van Lith 等人（2005）通过在转染的 HeLa 细胞和小鼠睾丸中进行脉冲追踪和蛋白质印迹实验表明，PDILT 在其生物合成过程中和稳定状态下都与内质网中的蛋白质相互作用。PDILT 在稳态下形成分子间而非分子内二硫键依赖性复合物。免疫沉淀分析证实PDILT与ERO1-α（ERO1L；615435）在转染的HeLa细胞的ER中。

Li等人（2018）利用重组人PDILT蛋白证明PDILT具有与人PDI相当的分子伴侣活性。

▼ 生化特征

Bastos-Aristizabal et al.（2014）以2.0埃的分辨率确定了人PDILT的非催化b素结构域（残基258至386）的晶体结构。该结构显示出硫氧还蛋白样折叠，包含 5 个 β 折叠，两侧有 4 个 α 螺旋。除了 4 条 β 链是反平行的之外，所有 5 条 β 链都是平行的。结构分析揭示了α螺旋1和3之间有一个保守的疏水口袋，这是PDIA1（P4HB）中主要底物结合口袋的位置。然而，钙联蛋白（CANXL; 114217）ERp57的识别机制（PDIA3；602046）在 PDILT 中不保守。

Li等人（2018）以2.38埃的分辨率测定了人PDILT的21至580位氨基酸的晶体结构。L形结构具有灵活的C末端尾部，与其他PDI家族成员的U形结构不同。PDILT 类硫氧还蛋白结构域的排列和结构也不同于典型的硫氧还蛋白折叠，前 3 个硫氧还蛋白样结构域形成紧凑的三角形结构。叠加分析表明，PDILT 结构具有离散的疏水斑块，与人 PDI 的结构不同，人 PDI 的内表面具有连续的疏水表面。作者提出该晶体结构类似于全长人类 PDILT 的底物结合构象。Li等人（2018）还发现，人类PDILT在溶液中主要以延伸分子二聚体的形式存在。溶液结构与晶体结构的不同之处在于，C端尾部参与二聚体界面，1个分子中的4个类硫氧还蛋白结构域以接近线性的方式排列，形成链状延伸结构，暴露出更多的硫氧还蛋白结构域。硫氧还蛋白样结构域的疏水区域。作者提出该溶液结构代表了 PDILT 的无底物构象。与柔性溶液结构相比，L形晶体结构刚性且致密，截断分析表明N端环对于稳定晶体结构很重要。相反，C 末端尾部对于稳定溶液中的二聚体结构非常重要，并且对于 PDILT 的伴侣活性至关重要。